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学科前沿进展论文 题 目: 原生质体融合技术的研究进展及应用 姓 名: 刘明明 学 院: 生命科学学院 专 业: 生物科学大类 班 级: 生物科学111 学 号: 1303110117 指导教师: 王松华 职称: 教授 2013年 6 月 16日 安徽科技学院教务处制 目录 摘要 …………………………………………………………………3 1.前沿……………………………………………………………………3 2.原生质体的制备 ……………………………………………………3 2.1起始材料 … ……………………………………………………3 2.2去壁 ……………………………………………………………3 2.3原生质体的保存 ………………………………………………3 3.原生质体的融合 ……………………………………………………4 3.1硝酸钠法 ………………………………………………………4 3.2高钙例子法 ……………………………………………………4 3.3 PEG法 …………………………………………………………4 3.4融合法……………………………………………………………4 3.5多聚化合物法……………………………………………………4 4.杂种细胞的筛选和鉴定 ……………………………………………5 4.1杂种细胞筛选方法………………………………………………5 4.1.1利用物理特征筛选…………………………………………5 4.1.2营养缺陷互补筛选法………………………………………5 4.1.3选择培养筛选法……………………………………………5 4.2杂种细胞的鉴定方法……………………………………………5 4.2.1形态学鉴定…………………………………………………5 4.2.2细胞学鉴定…………………………………………………6 4.2.3同工酶鉴定…………………………………………………6 4.2.4分子生物学鉴定 ……………………………………………7 5.原生质体融合技术的应用……………………………………………7 5.1植物原生质体融合技术 ………………………………………7 5.2微生原生质体融合技术 …………………………………………8 6.结论 …………………………………………………………………8 摘要: 原生质体融合技术是遗传育种上的一项重要技术,它具有遗传信息传递量大,不受亲缘关系的影响,可有目的地选择亲株以选育理想的融合株,便于操作等优点,在育种中具有广阔的应用前景。 关键词:原生质体融合；筛选；培养；应用 1.前言 原生质体融合技术起源于20世纪60年代，是基因重组的一部分。它通过一定的理化条件处理，诱导遗传特性不同的两亲本原生质体融合,经染色体交换、重组而达到杂交的目的,经筛选获得集双亲优良性状于一体的稳定融合子。原生质体融合与常规杂交相比有多方面的优势,除了能显著提高重组频率外,还具有定向育种的含义。原生质体融合可避免受精作用中的种的特异性配子识别反应，有可能打破远亲杂交中的有性不亲和界限，能把亲缘关系比较远,甚至毫无关系的生物体细胞融合在一起,为远缘杂交架起了桥梁,是改造细胞遗传物质的有力手段,它不仅在于打破了有性杂交重组基因创造新种的界限,更重要的是扩大了遗传物质的重组范围。 2.原生质体的制备 2.1起始材料 进行植物细胞原生质体融合实验中，起始材料及其生理状态对原生质体的制备及其活力有很大的影响。在以往的双子叶植物培养中，大多以叶片为分离原生质体的材料。今年来起始材料的适用范围有了较大扩展。目前，以愈伤组织、悬浮细胞和体细胞为材料制备原生质体的最主要方式；禾本科植物原生质体培养获得成功的实验，几乎都是用从幼体或成熟胚胎诱导形成的胚胎愈伤组织或胚性细胞来游离原生质体。采用这些材料制备原生质体的方法简便、产量高、不污染、不易破碎。 2.2 去壁 去除细胞壁的方法可以是机械的人工操作，也可以是利用酶解法。较早利用机械法制备原生质体，现