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4植物组织培养期末考试习题参考答案
仅供参考
植物组织培养复习题
一、名词解释
1植物细胞全能性2初代培养3继代培养4体细胞胚5胚的培养
9愈伤组织
15原生质体培养:用酶及物理方法除去细胞壁,对所得到的原生质体进行培养的方法。
16基本培养基:人工配制的仅能满足外植体最基本生长需要的培养基,如MS、MT、White培养基。
17完全培养基:在基本培养基的基础上添加各种各样的附加物(激素、有机物质等),具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件,含有满足各种营养要求的培养基
(3)发展简史:
(一)探索阶段(上世纪初至上世纪30年代中)
1902年德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特(Haberlandt) 在Schleiden和Schwann的细胞学说的推动下,提出了高等植物细胞全能性理论,是植物组织培养的理论依据,对植物组织培养的发展起了先导作用。
☆Haberlandt:观点——高等植物的组织和器官可以分割成单个细胞。贡献——提出细胞全能性、首次进行离体细胞培养
1904年,Hanning培养萝卜和辣根菜的胚成功;
1912年,Haberlandt的学生科特(Kotte)和美国的罗布林(Robins)在根尖培养中获得了组织培养的成功,形成了一些缺绿的茎和根。
(二)奠基阶段(上世纪30年代中至上世纪50年代末)
1934年美国的怀特(White)由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系
1937年建立了第一个组织培养的综合培养基White培养基,包括3种B族维生素,即吡哆醇、硫胺素和烟酸
1934高特里特(Gautheret)提出了B族维生素和生长素对组织培养的重要意义,于1939年连续培养胡萝卜根形成层获得首次成功。
Gautherer,White和Nobecourt一起被誉为组织培养学科的奠基人。
40年代斯库克(Skoog)和崔徵发现,腺嘌呤或腺苷可以解除培养基中生长素(IAA)对芽形成的抑制作用,而能诱导形成芽,从而明确了腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一 :即这一比例高时,产生芽;这一比例低时,产生根;相等则不分化。
1952年,莫雷尔(Morel)和马丁(Martin)通过茎尖分生组织的离体培养,从已受病毒侵染的大丽花中首次获得无病毒植株;
1953-1954年缪尔(Muir)使单细胞培养获得初步成功。
1955年米勒(Miller)等人发现了激动素。激动素可以代替腺嘌呤促进发芽,效果增加3万倍。
1957年,Skoog和Miller提出植物激素控制器官形成的概念
1958年,斯图尔德(Steward)等人,用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养,得到了完整植株,并且这一植株能够开花结实。首次证实了Haberlandt在关于细胞全能性的预言
1958年,Wickson和Thimann指出,应用外源细胞分裂素CTK可促成在顶芽存在的情况下打破腋芽的休眠。
71958-1959年,Reinert和Steward分别在胡萝卜愈伤组织培中形成体细胞胚。
(三)迅速发展阶段(上世纪50年代末至今)
1960年,科金Cocking开创植物原生质体培养和体细胞杂交研究工作。同年,Kanta植物试管受精首次成功。
1960年,Morel提出了一个茎尖离体无性繁殖兰花的方法——迅速建立起兰花工业;
1964年印度Guha和Maheshwari由花粉诱导得到单倍体植株,从而促进了花药和花粉培养的研究
1971年,Takebe证明了无壁的原生质体同样具有全能性,而且在实践上为外源基因的导入提供了理想的受体材料。
1973年Carlson等通过两个烟草物种之间原生质体融合,获得了第一个体细胞杂种
2.再分化分为四个水平,分别是什么?
(1)细胞水平的分化
(2)组织水平的再分化
(3)器官水平的再分化
(4)植株水平的分化
3.植物组织培养实验室的组成、无菌操作室、超净工作台种类及使用注意事项、化学实验室包括那些实验室?培养室定义及要求
●实验室的组成(1)准备室:器具的洗涤、干燥、消毒(2)配置室:进行药品的保存、配置、消毒、分装(3)灭菌室:培养基及使用器具的消毒与灭菌(4)接种室:材料接种,内置超净工作台或接种箱。外设缓冲间, 放置拖鞋、工作服、工作帽(5)培养室:将接种的材料进行无菌培养生长的场所(6)细胞学观察实验室:进行培养材料的组织学、细胞学观察照相等。
●无菌操作室:干净无菌、密闭、光线好
●超净工作台:用于培养物的无菌操作(由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成),分水平式和垂直式两种型号。
●化学实验室:包括洗涤室、药品室、称量室、培养基配制室、灭菌室
●培养室:将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。要求:需配有固定培养架、旋转式培养架、摇床和转床、控温、控光设备,以满足器官(芽、茎、花药)、愈伤组织、细胞和原生质体的固
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