Megazyme-破损淀粉试剂盒说明书.doc

简介： 淀粉损伤程度直接影响和面团混合性能，技术意义。此外，颗粒迅速水合α-和β-淀粉酶被水解产生可发酵的糖。在传统长期发酵过程的后期，当面粉中的天然糖酵母发酵，用于测量破损淀粉的方法大致可分为四大类，提取（“蓝值”），染料染色，近红外和酶消化。在这些α-淀粉酶，β-淀粉酶或这些酶的组合。谷物和真菌α-淀粉酶制剂已被用作粗麦芽提取或粗发酵液。传统上一直使用的非特异性程度，如铁氰化钾滴定法，或二硝基水杨酸（DNS）来测定。 原理： 真菌α-淀粉酶的淀粉颗粒经水合和水解麦芽糖加α-极限糊精。真菌α-淀粉酶处理的目的是受损的颗粒。终止反应试样纯化淀粉葡糖苷酶处理，降解为葡萄糖。葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂混合物进行葡萄糖。值表示为淀粉（损坏）面粉原样重量的百分比。 精度： ±3％的标准误。7-8页。 ：真菌α-淀粉酶40℃时分析Ceralpha试剂4℃可存放3年瓶2：淀粉葡糖苷酶（4，pH4.5和40200 U / mL的可溶性淀粉在pH4.5和40）。硫酸铵。 43年瓶3：GOPOD试剂缓冲。缓冲液（48，pH值7.4对羟基苯甲酸和叠氮化钠（0.4％/v）。43年瓶4：GOPOD试剂酶。葡萄糖氧化酶过氧化物酶和4 - 氨基安替比。冻干粉。-205年瓶50.2％（/v）苯甲酸D-葡萄糖标准溶液（5，1.5/mL）。5年瓶6??：小麦粉标准。显示小瓶标签上淀粉在室温5年。 -20℃，在低温下使用。-20℃下可保存3年以上。 用100mM的醋酸钠（试剂1）把一份1mL的瓶2的试剂稀释至10mL。-20℃下可保存3年以上。 用蒸馏水把瓶3的试剂（GOPOD 试剂缓冲液）稀释至1L（溶液3）。现配现用。 注： 1，如果该浓缩缓冲液保存在-20下，将形成1L时必须完全溶解。 2，浓缩缓冲液含有0.4％（/v）叠氮钠。这是一种有毒的化学品4，瓶4中的溶解在20毫升溶液3这是葡萄糖测定试剂（GOPOD试剂）。在2-53个月在-2012个月。 如果此试剂是。冷冻/解冻不要超过一次。 新鲜配制试剂浅黄色或浅粉红颜色。42-3个月。此溶液的吸光度应小于0.05。 试剂（未提供）： 1，醋酸钠缓冲液（100mM，pH5.0）。 -900毫升蒸馏水加入5.7毫升冰醋酸（1.05克/毫升）。氢氧化钠溶液（8克/ 100毫升）小心地pH值调整至5.0大约60毫升。 - 添加0.74g氯化钙溶解。缓冲储存于4在4。 2，稀硫酸（0.2％/v） 2.0浓硫酸小心地加入到 998的蒸馏水。2年。 设备（推荐）： 1，玻璃试管（圆底，16x100毫米，12毫升容量）。 2，微移液器，100微升（如吉尔森Pipetman?或的Rainin EDP-2?电动饮水机）。 3，容积式移液器，例如Eppendorf公司Multipette? - 12.5毫升（α-淀粉酶溶液）。 - 5.0毫升（淀粉葡萄糖苷酶）。 - 50毫升（稀硫酸GOPOD试剂）。 4，台式离心机（转速需要3000，即约1000）。可选（见注）。 5，分析天平。 6510nm分光光度计。 7，涡旋混合器。 8，40恒温水浴。 9，。 注意事项： 1，真菌α-淀粉酶面粉的时间必须小心控制（即10.0分钟）。 - 淀粉葡萄糖苷酶的时间不关键，但至少应10分钟。 - GOPOD试剂的时间不关键，但至少应20分钟。在40下进行至少2小时。 2，步骤4中，α-淀粉酶溶液 3，步骤中，淀粉葡糖苷酶混合 4，每测定，试剂空白和150的葡萄糖标准。 - 空白试剂由0.2缓冲液+4.0的葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂。 - 葡萄糖标准由0.1缓冲液 +0.1mL的葡萄糖标准（150微克/ 0.1毫升）+4.0毫升的葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂。 葡萄糖标准溶液0.2％的苯甲酸制备，可在室温下保存。 5，6，酶制剂交叉污染注： 1，如果离心机，稀硫酸后悬浮液可以通过Whatman1号滤纸或Whatman GF/ A玻璃纤维滤纸过滤，。 2，圆底玻璃试管。锥底试管混合和样品的结块。聚碳酸酯试管，。 3，在测定步骤4中，一些样品粘附到试管。这不影响测定的准确度。 4，建议GOPOD试剂这将试剂的使用寿命 5，使用移液器这些提高测定的重现性和便利性。 6，510 nm处的吸光度可能超过的葡萄糖标准。 如果出现这种情况，从检测步骤4中溶液用水适当地稀释， 检测程序： 1，准确称取小麦粉或粉碎糊化淀粉样品100±10毫克厚壁玻璃离心管（16 x 120毫米，12毫升的容量）。 240℃预平衡约5分钟。 3真菌α-淀粉酶溶液（50单位/毫升）玻璃烧杯40预平衡约5分钟4，加入1.0毫升的预平衡的真菌α-淀粉酶溶液（50单位/毫升），每管，旋涡混合器