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一、目的意义 人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。 果蔬品质的重要指标之一。 不同栽培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中维生素C的含量。 水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C含量,了解果蔬品质量的高低。 测定方法: 维生素C: 强的还原性 将染料2.6-D 还原成无色的2.6-D 2.6-二氯酚靛酚:强的氧化性 中性/碱性: 蓝色 酸性:红色 三、操作步骤 1. 样品提取 2.染料标定及样品中Vc测定 四、结果计算 五、注意事项 1. Vc不稳定,在空气中易被氧化,研磨时,尽可能要快,以减少Vc的氧化。 2. 2% 草酸可以有效抑制Vc氧化酶活性。若用样品含有大量Fe2+,可用8%醋酸溶液提取,因在2%草酸中Fe2+ 仍可以还原2,6-D, 改用8%醋酸溶液提取,Fe2+不会很快与染料起作用。 3.维生素C提取时要避光、避免与铜铁接触,以免Vc氧化。 4. 样品提取液定容时若泡沫太多,可加几滴乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。 5. 当样品本身带有颜色时,可以用白陶土脱色。 6. 滴定时间一般不超过2分钟,滴定终点以淡红色存在30秒为准。因为样品中某些杂质亦能还原2,6-D,但速度较Vc慢,假如滴定速度过慢,其它物质也会还原2,6-D。 六、思考题 1、为什么在测定维生素C的同时要进行2,6-D溶液的标定? 2、为了保证抗坏血酸含量测定准确, 应注意些什么? * * 实验一 维生素C含量的测定(2, 6-D滴定法) 滴定管活塞操作 滴定操作 2.6-二氯酚靛酚滴定法 滴定操作 2.6-二氯酚靛酚滴定法 还原型 抗坏血酸 氧化型2.6-二氯酚靛酚 (红色) 还原型2.6-二氯酚靛酚 (无色) 氧化型2.6-二氯酚靛酚(蓝色) O =C | HO— C ‖ HO— C | H— C | HO— CH | CH2OH O O =C | O = C | O = C | H— C | HO— CH | CH2OH O 脱氢 抗坏血酸 =N — — O- Cl | O= | Cl =N — — OH Cl | O= | Cl N — — OH Cl | HO | Cl — — | H H+ OH- 5g 新鲜蔬菜 少量 2%草酸 石英砂 充分研磨成匀浆 用2% 草酸洗入容量瓶, 并定容至100 mL 干燥滤纸过滤 快速匀浆? 为什么? 10 10 0 0 0 样品提取液 y0 V y1 2, 6-D滴定值 0 0 样品测定1 0 10 10 0 标准Vc 0 0 0 10 2%草酸 样品测定2 染料标定2 染料标定1 空白 试剂(ml) 取5个50 mL干燥洁净的三角瓶,编号,按下表操作: y1---滴定空白所用染料ml数 y0---滴定样品所用染料ml数 A---1mL染料溶液相当的抗坏血酸的mg数 样品重(g) × 100 × 100 10 抗坏血酸含量 (mg/100g 鲜重) = (y0-y1)×A 从上述标定求出
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