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【2017年整理】xibaopeiyang
肾脏的外缘弯弯地向外凸出。内缘又弯弯地向内凹陷.这个地方称做肾门。血管、神经、淋巴管、输尿管都由这里(肾门)进出肾脏。其排列顺序为:肾静脉在前、肾动脉居中、输尿管在后,该处合称为肾蒂。肾门向肾内延续为由肾实质围成的肾窦,窦内含有肾动脉、肾静脉的主要分支和属支、肾小盏、肾大盏、肾盂和脂肪组织等。肾的构造可以分为被膜和肾实质两部分以及双肾顶部的肾上腺。肾的被膜自内向外可分为三层: (1)纤维膜:为贴于肾实质表面的一层结缔组织膜,薄而坚韧,由致密结缔组织和少数弹力纤维构成。在正常状态下,容易与肾实质剥离。但在某些病理情况下,由于与肾实质粘连,而不易剥离。 (2)肾脏外面披着一层厚厚的黄色外衣,是由脂肪构成的.称做肾脂肪囊,起着固定、保护肾脏的作用。 (3)肾筋膜:位于脂肪囊的外面,由腹膜外组织发育而来。肾筋膜分前后两层,包绕肾和肾上腺。向上向外侧两层互相融合。向下两层互相分离,其间有输尿管通过。肾筋膜向内侧,前层延至腹主动脉和下腔静脉的前面,与大血管周围的结缔组织及对侧肾筋膜前层相续连;后层与腰大肌筋膜相融全。自肾筋膜深面还发出许多结缔组织小束,穿过脂肪囊连至纤维膜,对肾起固定作用。肾的内部结构又分两部分,周围称皮质,深部为髓质。 肾的解剖生理单位称为肾单位,由肾小球和肾小管组成。每个肾约有130万个肾单位。在正常情况下,肾单位交替地进行活动,因此肾具有很大的储备代偿能力。 肾小球由毛细血管丛和肾球囊构成,是血浆滤过的器官。肾小球毛细血管壁分3层,中间为基底膜,内侧有内皮细胞覆盖,外侧为脏层上皮细胞。毛细血管基底膜厚约320nm,可分为三层,中间为致密层,内侧和外侧各为内疏松层和外疏松层。毛细血管基底膜内面由一层扁平的内皮细胞覆盖。内皮细胞胞浆很薄,布满许多直径约70~100nm的小孔。脏层上皮细胞(又称足细胞)在基底膜外侧,胞浆丰富形成许多细长的分枝状突起称为足突。上皮细胞由这些足突附着于基底膜外疏松层。足突之间形成许多间隙,宽约20~30nm,称为滤过隙。距基底膜表面约60nm,在相邻的足突之间有一层薄膜称为滤过隙膜。毛细血管壁包括内皮细胞、基底膜、上皮细胞,共同组成肾小球的滤过膜。肾小球的滤过除与毛细血管的结构和滤过物质的分子大小有关外,并与基底膜的生物化学组成及其电荷有关。基底膜主要由型胶原和一些糖蛋白如层连蛋白、纤维连接蛋白和多聚阴离子多糖蛋白等组成。其中尤其是硫酸类肝素多糖蛋白带大量负电荷分布于内、外疏松层。此外,在毛细血管内皮细胞和脏层上皮细胞表面也有带负电荷的唾液酸糖蛋白。肾小球的负电荷可阻止血液中带负电荷的分子如白蛋白滤过。当肾小球多聚阴离子减少时滤过的蛋白质可增加。 在肾小球毛细血管之间有少量组织支持毛细血管网,并将毛细血管联系在一起,称为肾小球系膜,由系膜细胞和系膜基质组成。系膜基质充填在各叶毛细血管之间。系膜细胞散在于系膜基质内。系膜细胞有收缩功能,可参与调节肾小球毛细血管的血流。系膜细胞还具有吞噬功能,可吞噬进入肾小球的大分子物质。系膜细胞可产生血管活性物质、细胞因子和生长因子,并可产生系膜基质和胶原纤维,对清除肾小球滤过的物质以及与肾小球炎症和损伤时的增生和修复都有重要关系。各位战友好:本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总结,请分享!取材:1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法):取 Wistar 大鼠断颈法处死,立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。将大鼠转移入超净工作台,取腰部切口迅速取出肾脏,置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。取皮质置于80目筛网上,剪碎成1-2mm3大小组织块,网下放盛有少量生理盐水的培养皿。用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。收集 80 目网下液体转移至 100 网筛上,用生理盐水冲洗。将100目网上组织用生理盐水冲洗入另一培养皿中,收集置入离心管中。1500 转/分钟离心5分钟,弃去上清。2 肾小管节段的消化及培养用1.5ml 0.25%胰蛋白酶重悬沉淀,37温箱中消化约10分钟。加入3ml(双倍量)含有10%胎牛血清RPMI1640中止消化,1500 转/分离心8分钟,弃上清。加入约3ml RPMI1640 悬浮沉淀,并用吸管充分吹打混匀,接种于培养瓶中。分离肾小管节段接种于培养瓶后,第一天加入少量培养基,置入37,5%CO2孵育箱中静置培养。培养过夜后,第二天加入足量的培养基,静置培养。培养 72 小时后首次换液,以后每两天换液一次。约第六到七天细胞生长基本融合成单层。 (缩略图,点击图片链接看原图)
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