普通生物化学核酸酶学知识点.docxVIP

核酸问答题：1、某DNA样品含腺嘌呤15.1%（按摩尔碱基计），计算其余碱基的百分含量。2、DNA双螺旋结构是什么时候，1953,1962由谁提出来的？试述其结构模型。3、DNA双螺旋结构有些什么基本特点？这些特点能解释哪些最重要的生命现象？4、DNA和RNA的结构有何异同？5、RNA干扰的意义？1.是植物对抗某些病毒感染的机制；2.使转座子沉默，维持基因组的稳定性；3.抑制蛋白质合成，调控基因表达和个体生长发育；4.提供了使特定基因沉默的重要实验手段；5.为基因治疗提供了一条可能的途径.6、miRNA和siRNA的异同点。Pri-miRNA Pre-miRNA 细胞核miRNA 细胞质 dicer 单链 完全配对 不完全配对它们都是Dicer酶的产物；它们在起干扰、调节作用时都会和RISC复合体结合；它们都可以在转录后和翻译水平干扰以抑制靶标基因的翻译；名词解释：1、核酸变性和复性；2、分子杂交；3、增色效应和减色效应；4、回文结构；5、Tm；6、Chargaff定律；7、surthern杂交技术；8、DNA指纹技术1. 在物理、化学因素影响下， DNA碱基对间的氢键断裂，双螺旋解开，这是一个是跃变过程，伴有A260增加（增色效应）。复性：在物理、化学因素影响下， DNA碱基对间的氢键断裂，双螺旋解开，这是一个是跃变过程，伴有A260增加（增色效应）。2. 不同来源的DNA单链间或单链DNA与RNA之间只要有碱基配对的区域，在复性时可形成局部双螺旋区，称核酸分子杂交(hybridization)3. DNA变性 复性过程中A260nm增加 减少的过程。4. 回文结构 DNA双链中正序反序碱基顺序相同的碱基对序列。5. TmDNA热变性过程中A260达到最大值的一半时的温度。6. C=G A=T A+G=C+T A+C=G+T 7. 分析DNA样品中是否含有与探针序列同源的DNA片段8. 利用人体内小卫星DNA的高度多态性，将重复序列作为分子探针，与不同个体的基因组DNA的限制性酶切片段进行分子杂交，就会得出各自特有的杂交图谱，具有专一性和特征性，即DNA指纹。酶学问答题：1、何谓酶？酶促反应的特点是什么？酶（enzyme）是由活细胞合成的、对其特异底物起高效催化作用的生物大分子，是机体内催化各种代谢反应最主要的催化剂。易失活 高催化效率 专一性强 反应活性可控2、酶促反应高效率的机理是什么？ 通过结合自由能降低反应的活化能，邻近效应 定向效应3、简述丝氨酸蛋白酶的催化机理？丝氨酸羟基作为亲核基团进攻亲电中心，形成新的酯键，肽键断裂，形成的酰基-酶中间物被水解，酶还原。4、什么是全酶、酶蛋白和辅助因子，在酶促反应中各起什么作用？ 全酶=蛋白质+辅助因子 酶蛋白是缀合酶的蛋白质部分，辅助因子是缀合酶的非蛋白质部分，小分子有机化合物 金属离子5、酶分为哪几大类，分别催化何反应？氧化还原酶 氧化还原反应转移酶 催化基团转移反应 谷丙转氨酶水解酶 催化底物的加水分解反应裂合酶 从底物分子中移去原子或基团形成双键及其逆反应异构酶 催化同分异构体的相互转化合成酶 催化C-C等键的形成 与ATP分解反应相互偶联6、构成酶活性中心的常见必需基团有哪些？结合基团 催化基团丝氨酸残基的羟基 组氨酸残基的咪唑基 半胱氨酸残基的巯基 酸性氨基酸残基的羧基酶的催化活性在体内有哪些调控方式？浓度水平的调节 活性水平的调节 酶与底物的不同定位 真核抗体酶的生产步骤？反应过渡态类似物为半抗原制作单克隆抗体，筛选出具有高催化活性的单抗即为抗体酶。名词解释：酶的特异性；酶对它所催化的反应及其底物具有的严格的选择性。通常一种酶只能催化一种或一类化学反应。2、酶的活性中心；必需基团在空间上彼此靠近形成具有一定结构的空间区域，该区域与底物结合并将底物转化为产物，这一区域称为酶的活性中心。3、缀合酶；缀合酶（conjugated enzyme）是除了在其组成中含有由氨基酸组成的蛋白质部分外，还含有非蛋白质部分。4、诱导契合假说；当酶分子与底物接近时诱导酶分子构象发生变化以利于与底物的结合，形成复合物后，促进底物发生化学反应。5活化能；在一定温度下1摩尔底物全部进入活化态所需的自由能(kJ/mol)。6、辅酶与辅基；缀合酶中非蛋白质部分，辅助因子，结合紧密程度，辅基 辅酶。7、酸碱催化；瞬时向反应物提供质子；或向反应物接受质子；以稳定过渡态，加速反应的一类催化机制。8. 共价催化；亲核 亲电子催化 酶亲核催化剂释放电子与底物缺电子中心形成不稳定的共价中间复合物，降低反应活化能9、抗体酶具有催化能力的免疫球蛋白。5.11问答题：叙述Km值、Kcat值及Kcat/Km的意义。 KM = (k-1 + k2)/k1，米氏常数，最大反应速度一半时对应的底物浓度[S]足够大时，Vm