槐米中芦丁含量的测定案例.pptVIP

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BREAD PPT DESIGN 槐米中芦丁含量的测定 槐树原产于中国。它用途广泛,功能大,是一种集药用、食用、保健、观赏于一身的优良树种。槐树自古是治病的重要药源植物,被誉为“金药树”槐树依据其花色分为白、青、黄、金槐等4个类别.除了国槐外,槐树还有龙爪槐、蝴蝶槐、金叶国槐、五色槐、黄金槐、双季米槐、香花槐和金花槐等变种。 它全身都是药,花、叶、枝、根、果实及种子均可入药,以槐花入药最普遍。洋槐五月开花,其花一般食用,国槐七八月才开花,其花入药。故我国药用槐米多出自国槐。 金药树—槐树 槐米 2010年《中华人民共和国药典》规定,槐树的药用部分为干燥的花朵及花蕾。前者习称“槐花”,后者习称“槐米”。 槐米中含有芦丁、槲皮素、皂甙、多糖黏液质等成分,其中,芦丁是主要药用成分,因此对其研究有非常现实的意义。 芦丁 芦丁是一种黄酮类化合物。槐米中的芦丁随槐花的产地及收取时间的不同其含量在10%~28%之间,我国芦丁生产主要以槐米为原料。 芦丁的药理作用 抗炎作用 抗氧化作用 抗菌作用 抗癌作用 对脑缺血损伤的保护作用 对肾脏缺血损伤的保护作用 降血压作用 胃肠粘膜保护作用 芦丁的化学特性 芦丁分子式C27H30O16,分子量610.51,为浅黄色针状结晶,难溶于冷水,可溶于热水、甲醇、乙醇、吡啶,易溶于碱水。 芦丁提取技术概述 1 3 2 4 5 醇溶剂浸提法 热水提取法 碱提酸沉降法 超声辅助提取法 微波提取法 超声波辅助提取法 利用超声波的空化效应、湍流效应、微扰效应、界面效应和聚能效应等物理作用,加速被破碎物细胞壁的破裂,促进细胞内含物的溶出,从而实现天然产物低温、快速提取的目标。具有杂质含量低、有效成分含量高、提取时间短的优点。 芦丁为细胞中的次生代谢产物,存在于细胞质中;通过粉碎,破坏细胞壁和细胞膜,也就使芦丁易于被提取出来。碱液对芦丁有增溶作用,用碱液浸泡后,能使更多的芦丁溶解出来,同样也有利于芦丁的提取。 水平 因素 A B C 料液比 提取时间 温度 1 1:10 7 15 2 1:15 10 25 3 1:20 13 35 因素设计 查正交实验表,根据L9(34)设计实验 试验号 水平组合 实验条件 料液比 提取时间 温度 1 A1B1C1 1:10 7 15 2 A1B2C2 1:10 10 25 3 A1B3C3 1:10 13 35 4 A2B1C2 1:15 7 25 5 A2B2C3 1:15 10 35 6 A2B3C1 1:15 13 15 7 A3B1C3 1:20 7 35 8 A3B2C1 1:20 10 15 9 A3B3C2 1:20 13 25 实验流程 槐米粉碎 过40筛目 按一定料 液比混合 加入亚硫氢钠、 硼砂,用氢氧化 钠调PH至9 超声提取 酸沉 用盐酸将PH调至3 离心过滤 芦丁粗提产品 滤液静置、干燥 芦丁标准曲线的绘制 精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁标准品200mg,置100mL容量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,摇匀即得(每1mL中含无水芦丁0.2mg)。精密量取上述标准溶液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL与6.0mL分别置25mL容量瓶中,各加水至6mL,加5%亚硝酸钠溶液1mL使混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1mL摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟;按照分光光度法,在500nm的波长处比色测定吸光度,以吸光度为纵坐标,芦丁浓度为横坐标,绘制标准曲线。 取干燥芦丁粗品约1g,精密称定,加甲醇溶解后移入100mL容量瓶,再加甲醇洗涤并入容量瓶,加甲醇至刻度,摇匀。精取10mL置100mL容量瓶,加水至刻度,摇匀。精密量取3mL置25mL容量瓶中,按照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6mL”起依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的浓度,计算即得槐米中芦丁的提取得率。 芦丁的提取率测定 芦丁的纯化——大孔树脂 减法测定法 树脂的预处理 新鲜树脂先用乙醇浸泡2次,每次12h,滤去浮游物和破碎树脂,再用甲醇浸泡2~3次至上清液澄清,最后用去离子水清洗1~2次.采用湿法上柱,并用和洗脱剂同浓度的甲醇水溶液冲洗2~3柱体积,以达到该浓度下的平衡状态。 用过的树脂,用足量甲醇浸泡使吸附物解吸达到再生的目的。如果反复使用树脂吸附效果下降,可用3%NaOH及10%NaCl混合液浸泡清洗12h,滤去溶剂并用去离子水充分洗涤至呈中性时即可。 提纯方法

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