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限制性核酸内切酶 能够识别DNA上的特定碱基序列并从这个位点切开DNA分子。 第一个核酸内切酶EcoRI是Boyer实验室在1972年发现的,它能特异性识别GAATTC序列,将双链DNA分子在这个位点切开并产生具有粘性末端的小片段。 * 几种主要DNA内切酶所识别的序列及其酶切末端。 * 基因克隆的载体 仅仅能在体外利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶进行DNA的切割和重组,还远远不能满足基因工程的要求,因为大多数 DNA片段不具备自我复制的能力,只有将他们连接到具备自主复制能力的DNA分子上,才能在寄主细胞中进行繁殖。 载体(vector)是指具备自主复制的DNA分子,象病毒、噬菌体和质粒等相对分子量较小的复制子均可以作为基因导入的载体。 * 载体三要素: 自我复制能力; 携带外源基因片段大小(具有较小的分子量和较高的拷贝数); 插入位点多少(具有若干限制酶单一识别位点); 易于鉴定识别(具有抗菌素抗性基因) * * * DNA连接酶能把不同的DNA片段连接成一个整体 * 重组DNA操作过程示意图 * * * Gene regulation gives the cell control over structure and function, and is the basis for cellular differentiation, morphogenesis and the versatility and adaptability of any organism. Gene regulation may also serve as a substrate for evolutionary change, since control of the timing, location, and amount of gene expression can have a profound effect on the functions (actions) of the gene in a cell or in a multicellular organism. * The patchy colours of a tortoiseshell cat are the result of different levels of expression of pigmentation genes in different areas of the skin. * Several steps in the gene expression process may be modulated, including the transcription, RNA splicing, translation, and post-translational modification of a protein. * Housekeeping genes(管家基因): expressed constitutively, essential for basic processes involving in cell replication and growth. Inducible genes(可诱导基因): expressed only when they are activated by inducers or cellular factors. * * 操纵子:是指细菌基因表达和调节的基本单位,其中含有启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因,以及调节基因。操纵基因受调节基因表达产物的控制。 * * * # Epigenetic 表观遗传 表观遗传(epigenetics) :是指DNA序列不发生变化,但基因表达却发生了可遗传的改变。 1942年,提出epigenetics一词, 认为是遗传学领域中探讨基因型 与表型之间相互关系的一个新方向。 DNA 甲基化修饰 组蛋白修饰 RNAi * # What you eat can change you gene expression * 转基因和DNA重组技术 * 什么是转基因? A transgene is a gene or genetic material that has been transferred naturally, or by any of a number of genetic engineering techniques from one organism to another. The introduction of a transgene has the potential to change the phenotype of an org
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