8第八章病毒的遗传例析.ppt

宿主范围突变型 噬菌体感染细菌，首先需要吸附在细胞表面，受体发生改变（抗性突变），则可导致噬菌体宿主范围的缩小， 噬菌体突变也可扩大寄生范围。 第三节 噬菌体突变的重组测验 一、Benzer 的重组测验 二、T2突变型的两点测交与作图 三、λ噬菌体的基因重组与作图 一、Benzer的重组测验与基因的精细结构分析 T4噬菌体有一种快速溶菌突变型，产生大而边缘清楚的噬菌斑，而野生型噬菌斑小而边缘模糊。Benzer对一组快速溶菌突变型进行了详尽的研究，并提出顺反子、重组子、突变子的概念。 重组测验 重组测验 B K(λ) T4噬菌体： 野生型 小噬菌斑 小噬菌斑 rⅡ 大噬菌斑 无噬菌斑 Benzer将两个rⅡ 不同突变型如r47+和+r104双重感染B菌株，收集子代噬菌体，再分别感染B菌株和K(λ)菌株； 在B菌株的细胞中，r47+、+r104、 r47 r104和 + +都能生长，形成噬菌斑； 在K(λ)菌株的细胞中，只有野生型+ +重组子能够生长，并形成噬菌斑 r 47 r47 r47 + + r104 精细作图 r47 + + r106 r47 + + r102 B菌株 K菌株 重组频率计算： 将收集到的子代噬菌体稀释106倍后可以平均在B菌株平板形成一个噬菌斑；将收集到的子代噬菌体稀释2×102倍后可以平均在K(λ)菌株平板形成一个噬菌斑。 根据以下公式计算r47+和+r104之间的重组值 重组测验 按照Benzer测定重组值的方法，理论上可以检 测到两个突变之间重组率为0.0002%，但是，实际上 所观察到的最小重组率为0.02%。 重组子（recom）：也称交换子，基因内不能由交换 （或重组）分开的最小遗传单位。 * * 二、T2突变型的两点测交与作图 性状：快速溶菌突变、宿主范围突变 快速溶菌突变： 正常的T噬菌体r+：噬菌斑小而边缘模糊 快速溶菌突变体r：产生约大两倍的边缘清楚的噬菌斑 宿主范围突变： T2噬菌体野生型h+：只侵染B菌株，不能*B/2株 T2噬菌体的突变体h：可侵染B株及*B/2株 *B/2株是大肠杆菌B株的突变体，它对T2噬菌体有抗性。 * * 二、T2突变型的两点测交与作图 1、双重感染（double infection） 亲本：hr+ （宿主范围突变）：能感染B和B/2菌株产生的噬菌斑小而边缘模糊。 亲本：h+r （快速溶菌突变）：仅能感染B株，产生约大两倍的边缘清晰的噬菌斑。 将两个亲本hr+和h+r同时感染B菌株； 用hr+和h+r两种噬菌体同时感染B菌株，称为双重感染（复感染）。在双重感染的过程中，hr+和h+r相互作用（即基因可以发生交换），所以在其子代中可以得到hr和h+r+的重组体,因此子代噬菌体有四种基因型： hr+、h+r （亲本型） hr、h+r+ （重组型） 双重感染作用相当于hr+×h+r的杂交 2、重组值的测定 ●杂交子代噬菌体基因型的测定 方法：收集双重感染后释放的子代的噬菌体，将其接种在同时长有B及B/2株培养上，观察、记录噬菌斑的形态。 〇亲本型 h+r：半透明，大 hr+：透明，小 〇重组型 hr：透明，大 h+r+：半透明，小 计算 重组值=重组噬菌斑数/总噬菌斑数×100% =(h+r++hr)/(h+r+hr++h+r++hr) ×100% 举例： a. 求出重组型 表8-4 用rxh+×r+h所得的四种