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漫谈《细胞生物学》：细胞生物学发展史上的里程碑事件事件:细胞的发现1590年J. Janssen和Z. Janssen制作第一台复式显微镜。1665年Robert Hooke出版《显微图谱》，观察了软木，并首次用cells来描述“细胞”。A van Leeuwenhoek是第一个描述活细胞的科学家。消色差显微镜出现，人们才对细胞的结构和功能有了新的认识。这些工作对细胞学说的诞生具有重要意义。1831年R. Brown在兰科植物表皮细胞内发现了细胞核。1836年GG. Valentin在动物神经细胞中发现了细胞核与核仁。细胞学说通常认为施莱登（MJ. Schleiden）和施旺（T.Schwann）正式提出了细胞学说。1838年Schleiden发表“植物发生论”，认为细胞是构成植物的基本单位。1839年Schwann发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”，指出动植物都是细胞的聚合物。1855年R. Virchow提出著名论断；进一步完善了细胞学说。Cell Theory是19世纪的重大发现之一，其基本内容有三条：①有机体是由细胞构成的；②细胞是构成有机体的基本单位；③新细胞来源于已存在细胞的分裂。细胞超微结构研究1932年E. Ruska和M. Knoll发明第一台透射电镜（TEM），人类视野进入超微领域。1952年英国工程师Charles Oatley制造出了第一台扫描电镜（SEM）。分子细胞生物学时代1869年瑞士人F. Miescher从脓细胞中分离出核酸，但未引起重视。1944年O. Avery等通过细菌转化试验，1952年M. Chase等通过噬菌体标记感染实验肯定了核酸与遗传的关系。1952年Franklin拍摄到清晰的DNA晶体X-衍射照片1953年，Watson 和Crick提出DNA双螺旋模型。1958 年提出“中心法则”。1961-1964年破译遗传密码。1972年创建DNA体外重组。1973年重组质粒，并在大肠杆菌中表达。1990年，美国国立卫生研究院（NIH）进行了世界首例基因治疗。通过学习细胞学发展简史，你如何认识细胞学说的重要意义?推动产业革命，创造新的经济生长点（转基因动植物，基因武器等）推动医学革命，延长人类寿命（干细胞研究、基因改造人、抗癌婴儿）推动绿色革命，解决食品危机（转基因技术）创造新品种，改善生态环境（抗旱、抗寒、抗盐植物基因的发现，三废处理的基因工程）发展绿色能源，解决能源危机（生物能、植物光合作用、人工光解水）细胞生物学的研究方法：分辨率概念及分辨率的调节分辨率：区分邻近两个物点最小距离的能力。分辨率（R）大小决定于光的波长（λ）、镜口率（N.A.）和介质折射率（n）。R=0.61λ/N.A. （N.A.=n·sinα/2）2.不同显微技术的适用性㈠光学显微镜普通光学显微镜：对不同细胞组分进行选择性染色能显示出细胞中特殊部分如核或膜。相差显微镜和微分干涉差显微镜：可直接从显微中观察未经固定和染色的活细胞。细胞荧光技术（已被广泛利用）：用荧光显微镜可观察细胞中的荧光。激光扫描共聚焦显微术㈡电子显微镜透射电子显微镜：用于观察超微结构（小于0.2μm）制样技术超薄切片技术：超薄切片机固定技术：固定剂（戊二醛和锇酸）负染法和投影法：样品本身显浅色，立体的形象复刻和冷冻蚀刻技术扫描电子显微镜与电镜相关的技术扫描隧道电子显微镜3.超薄切片技术的过程一个一般大小的动物细胞要切成300片。方法与步骤：锇酸和戊二醛固定样品----丙酮逐级脱水---环氧树脂包埋-----以热膨胀或机械伸缩的方式切片----重金属（铀，铅）盐染色．4. 电子显微镜的染色方法负染法是在将颗粒和纤维样品分散在具有亲水性支撑膜的载网上以后，滴加磷钨酸或醋酸双氧铀等染料，并随即吸去多余的染液。样品干燥后残余染料将沉积在样品的周围以及样品的凹陷、空隙处，而样品本身反而呈浅色，故称为负染。5.常用固定剂，包埋剂固定剂：戊二醛、锇酸包埋剂：环氧树脂原位杂交技术用核酸探针确立特殊核苷酸序列在染色体上或在特殊类型细胞中的位置，这种方法称为原位杂交技术。细胞膜和物质运输：质膜、内膜和生物膜的异同细胞膜（质膜）：是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质以非共价键结合形成的薄层结构。内膜：形成各种细胞器的膜。生物膜：质膜和内膜的总称。细胞膜的化学组成细胞膜主要是有脂类和蛋白质（包括酶）组成。脂类约占总量的50%（磷脂、胆固醇和糖脂）蛋白质40%【外在蛋白（或外周蛋白）内在蛋白（或整合蛋白）】糖类约占1%~10%（形成糖脂和糖蛋白）膜蛋白类型镶在膜内外表面的称为外在蛋白嵌入到膜内的蛋白或横跨全膜的蛋白称为内在蛋白4. 流动镶嵌模型的特点1). 细胞膜由流动的双脂层和嵌在其中的蛋白质组成。2). 磷脂分子以疏水性尾部相对，极性头部朝向水相组成