生物选修一 5-1 DNA的粗提取与鉴定.pptVIP

* 讨论： 1.构成生物体的遗传物质是什么？ 2.细胞滤液中又哪些成分？ 3.怎样才能将细胞内的这些物质分离出来？ 提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分 1.DNA在NaCl溶液中的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反 ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图，思考在什么浓度下，DNA的溶解度最小？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？ ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出？ 当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L时，DNA的溶解度最大，浓度为 0．14 mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使DNA在盐溶液中溶解或析出 2.DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。 3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ①蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响； ②大多数蛋白质不能忍受60－80°C的高温，而DNA在80℃以上才会变性； ③洗涤剂可以溶解细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。 4.DNA的鉴定 DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可作为鉴定DNA的试剂 （一）实验材料的选取 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 DNA含量高的生物材料 动物细胞 植物细胞 思考与讨论： 1.可否选用哺乳动物的红细胞作为实验材料？ 答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是低渗液体，水分子可大量进入血细胞，使其胀裂；而搅拌加速了鸡血细胞的破裂，从而释放出DNA。 2.用鸡血做实验材料时，在破碎细胞前要做何处理？ 3.为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 答：哺乳动物的红细胞没有细胞核，DNA含量较低，因而不宜作实验材料。 1.提取植物细胞DNA时，加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 答：洗涤剂能溶解细胞膜，利于DNA的释放； 食盐的成分是NaCl，利于DNA的溶解。 2. 如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？ 答：会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量少，影响实验结果（看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色）。 3. 研磨过滤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 答：可能含有核蛋白、糖类、RNA等杂质。 （三）去除滤液中的杂质 方案一： 为什么反复溶解与析出DNA，能够去除杂质？ 答：用高盐浓度（2mol/L）溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度（1.