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三、实验器材 1、辣椒,苹果 2、容量瓶25ml(×1) 3、吸管1.0ml(×1)、10.0ml(×1) 4、微量滴定管2ml(×1) 5、电子分析天平 6、研钵 7、漏斗 四、实验试剂 2%草酸溶液、1%草酸溶液、标准抗坏血酸溶液(0.1mg/ml)、0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液 实验一 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法) 一、目的 掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法 二、原理 维生素C又称抗坏血酸(ascorbic acid)。在1928年,从牛的肾上腺皮质中提出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。 还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐,本身则氧化成脱变为氢抗坏血酸。在酸性溶液中, 2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。 因此,可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。如无其他杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。 五、操作步骤 1、样品的提取 水洗净,用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取2.5g,研碎,过滤,全部转入25ml容量瓶中,用2%草酸溶液稀释至刻度,滤液备用。 2、滴定 ( 1)标准液滴定 准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml(含0.1mg抗坏血酸)置100ml锥形瓶中,加9ml1%草酸,微量滴定管0.1% 2,6-二氯酚靛酚滴定1至淡红色,并保持15s即为终点。由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸。 (2)样液滴定 准确吸取滤液两份,每份10.0ml分别加入两个100ml锥形瓶内,滴定方法同前。 注意:滴定过程宜迅速,一般不超过2min。滴定所用的染料不应少于1ml或多于4ml,如果样品含抗坏血酸太高或太低时,可酌量增减样液。 六、计算 m=VT×100/m0 m:100g样品中含抗坏血酸的质量(mg) V:滴定时所用去染料体积数(ml) T:每ml染料能氧化抗坏血酸质量数(mg/ml) m0:10ml样液相当于含样品之质量数(g)
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