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RP—HPLC法测定紫杉醇注射液的含量及有关物质 　　【摘要】 目的 建立高效液相色谱法测定紫杉醇注射液的含量及有关物质的方法。方法 应用HPLC法， 色谱柱为Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 检测波长为227 nm， 柱温35℃， 流速为1.0 ml/min， 进样量为20 μl， 流动相为甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。结果 紫杉醇浓度在10～125 mg·L-1的范围内， 溶液的浓度与色谱峰面积线性关系良好（R2=0.9998， n=6）。精密度试验RSD为0.17%（n=5）， 平均加样回收率为99.33%， RSD=0.38%。结论 本方法简便、准确、快速、重复性好， 可用于紫杉醇注射液的含量测定和有关物质检查。 　　【关键词】 紫杉醇注射液；高效液相色谱法；含量测定；有关物质 　　紫杉醇（paclitaxel）是从短叶紫杉树皮中提取的具有抗癌活性物质， 为一种新型的抗微管药物[1]。紫杉醇的作用机制为：促进微管双聚体装配成微管， 并通过干扰去多聚化过程而使微管的稳定， 从而抑制微管网正常动力学重组， 导致细胞分裂受阻。此外， 本药还具有放射增敏效应， 可促进离子照射所致细胞损害[2， 3]。临床上紫杉醇注射液主要用于卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等癌症的治疗[4， 5]。药物含量是评价药品质量的重要指标之一， 为保证紫杉醇注射液的质量， 实现临床用药安全可靠， 作者尝试建立高效液相色谱法（HPLC）测定其含量。该方法准确， 重复性好， 专属性强， 与中国药典2010年版收录的紫杉醇含量测定方法相比较， 具有简便、快速的优点。 　　1 仪器与试药 　　岛津LC-15C高效液相色谱仪；岛津SPD-15C Essentia uv/vis检测器；岛津工作站LC-solution；AR 1140 型电子天平（梅特勒·托利多仪器有限公司）；KQ3200E 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AUW 120D 型电子天平（日本岛津公司）。 　　紫杉醇对照品（许昌恒生药业有限公司提供， 纯度99.9%， 批号为A0177）；紫杉醇注射液（购于江苏红豆衫药业有限公司， 规格5 ml/30 mg， 批号分别；甲醇（色谱纯）（天津市四友精细化学品有限公司）；乙腈（色谱纯）（天津市四友精细化学品有限公司）；其它试剂均为分析纯， 水为超纯水。 　　2 方法与结果 　　2. 1 色谱条件 色谱柱：Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 检测波长227 nm， 柱温35℃， 流速为1.0 ml/min， 进样量为20 μl， 流动相为甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。 　　2. 2 对照品溶液的配制 精密称取紫杉醇对照品适量， 置于10 ml容量瓶中， 加乙醇稀释并定容至刻度， 摇匀， 得浓度为500 mg·L-1对照品贮备液。 　　2. 3 样品溶液的制备 分别取批号3批紫杉醇注射液适量， （相当于紫杉醇6 mg）置于100 ml容量瓶中， 加乙醇稀释并定容至刻度， 摇匀即得。 　　2. 4 专属性试验 紫杉醇对照品（A）和样品中紫杉醇的HPLC图（B）， 见图1。 　　图1 对照品（A）及样品（B） 　　2. 5 线性关系考察 精密量取“2.2”项下对照品溶液0.2、0.4、1.0、2.0、2.5 ml， 分别置于10 ml容量瓶中， 用乙醇稀释并定容至刻度， 摇匀， 得到对照品浓度分别为10、20、50、100、125 mg·L-1的溶液；进样， 记录峰面积值。以对照品浓度（X）为横坐标， 对照品峰面积（Y）为纵坐标， 进行线性回归， 得回归方程：Y=40555X-34526， R2=0.9999。由此可知紫杉醇含量在10～125 mg·L-1时线性关系良好。 　　2. 6 精密度试验 取“2.2”项下对照品溶液， 按“2.1”项下色谱条件连续进样6次， 其峰面积的RSD为0.17%（n=5）。 　　2. 7 稳定性试验 取“2.3”项下样品溶液（批号在室温避光下放置， 分别于0、2、4、6、8、12 h时， 在仪器不关闭状态下测定不同时间内的含量。结果， 样品含量的RSD为0.26%（n=6）， 表明样品溶液在12 h内稳定性好。 　　2. 8 加样回收率试验 精密量取已知含量批号紫杉醇注射液适量（相当于紫杉醇3 mg）， 分别精密加入紫杉醇对照品适量， 置于100 ml容量瓶中， 用乙醇稀释并定容至刻度， 摇匀， 按“2.1”项