光合细菌产类胡萝卜素的条件研究与制备光合细菌产类胡萝卜素的条件研究与制备.docVIP

光合细菌产类胡萝卜素的条件研究与制备* 摘 要:光合细菌(Photosynthetic bacteria)是生产类胡萝卜素的主要微生物,因其生产周期短,不受季节限制,而且菌体含有丰富的蛋白质,色素提取后的残留物可用作饵料、饲料等而备受科学工作者的重视。为了便于光合细菌中类胡萝卜素的大规模开发和利用,本文将对光合细菌的生长条件及所得类胡萝卜素制品的性质进行研究。 关键词:光合细菌;类胡萝卜素;条件研究;制备 0 引言 类胡萝卜素是一类具有特殊功能的天然色素的总称,广泛存在于自然界的动物、植物、真菌、藻类和细 菌中。类胡萝卜素的抗氧化作用,远远高于维生素E和维生素C,成为受国际药物、膳食补充剂、功能食品 界等广泛关注的新型抗氧化活性物质,被誉为21世纪抗氧化剂时代的/新贵0[1]。 目前提取类胡萝卜素的途径很多,其中最常用的有两种:一是用培养盐藻来提取类胡萝卜素,这种方 法需要在高盐份的海域环境,所以只能在少数地区养殖,生产的局限性很大,不宜大范围推广;二是用微生 物发酵法生产类胡萝卜素,目前能够发酵产生类胡萝卜素的微生物主要有真菌、细菌和酵母菌等[2-3]。 光合细菌(Photosynthetic bacteria)是生产类胡萝卜素的主要微生物,因其生产周期短,不受季节限 制,而且菌体含有丰富的蛋白质,色素提取后的残留物可用作饵料、饲料等而备受科学工作者的重视。为 了便于光合细菌中类胡萝卜素的大规模开发和利用,本文将对光合细菌的生长条件及所得类胡萝卜素制 品的性质进行研究[4-5]。 1 培养基的配制[6] 1.1 RCVBN培养基(固体/液体): 无机盐溶液 10% 微量元素溶液 0.1% 生长因子溶液 0.1% 20% DL-苹果酸溶液 2% 20% (NH4)2SO4溶液 0.5% 磷酸缓冲液 1.5% pH 6.8 121e灭菌 20分钟 (1)无机盐溶液(1000ml) MgSO4#7H2O 2.0g CaCl2#2H2O 0.75g FeSO4#7H2O 0.12g )89) 第11卷第2期 潍坊学院学报 Vol.11 No.2 2011年4月 Journal of Weifang University Apr.2011 *收稿日期:2010-11-20 作者简介:郭丹(1981-),女,吉林双辽人,烟台职业学院食品与生化工程系助教。 EDTA 0.2g pH 6.8 (2)微量元素溶液(250ml) H3BO3 0.7g MnSO4#H2O 0.398g NaMoO4 0.188g ZnSO4#7H2O 0.06g Ca(NO3)2#3H2O 0.01g pH 6.8 (3)磷酸缓冲液(1000 ml) KH2PO4 40g; K2HPO4 60g。 (4)生长因子溶液(100ml) 生物素 1.5mg; 盐酸硫胺素 100mg; 尼克酸 100mg; 对氨基苯甲酸 100mg; pH 6.8。 (5)20% DL-苹果酸溶液(100ml) 20g DL-苹果酸,用约1/3体积12N NaOH调至pH值6.8。 (6)20% (NH4)2SO4溶液(100ml) 20g的(NH4)2SO4溶液以12N NaOH调至pH值6.8。 1.2 乙酸钠乙酸铵培养基 无机盐溶液10%,微量元素溶液0.1%,生长因子溶液0.1%,磷酸缓冲液1.5%(以上溶液的配制同 RCVBN培养基),乙酸钠1g,乙酸铵1g,蒸馏水1L,pH =6.8,121e灭菌20min。 1.3 乙酸盐培养基 乙酸钠2g,KH2PO40.5g, K2HPO40.5g,MgSO4#7H2O 0.2g,CaCl20.14g,NH4Cl 0.8g,NaCl 011g,酵母膏0.5g,水1L,pH=7.0,121e灭菌20min。 1.4 YP培养基 蛋白胨10g,酵母膏5g,NaCl 5g,pH=6.8,121e灭菌20min。 2 菌种培养 2.1 菌种活化 取冰箱冷藏菌种在Y