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真核生物转录终止与转录后修饰,即poly A尾巴结构的添加密切相关。 在poly A修饰位点的下游存在一组共同序列AATAAA和GTGTGT……,为转录终止的识别修饰位点。 在转录越过修饰点后,RNA链在修饰点处被切断,随即进行加帽和加尾修饰。 真核生物和原核生物转录的差别 DNA 核 核糖体 新生蛋白质 真核生物 原核生物 mRNA前体 转运 加工 mRNA mRNA ? 真核生物中转录与复制在不同的区域 ? RNA聚合酶不相同 ? 启动子不同 ? 转录后RNA加工修饰不同 (三)RNA的复制 RNA病毒的遗传基因有 (+)RNA (-)RNA (±)RNA 1. 概念:以RNA为模板合成RNA 的过程。 2. 复制方式:自学 总是以RNA(+)为模板合成蛋白质。 四、转录后修饰 Post-transcriptional Modification 最初转录生成的RNA一般是不成熟的,需要经过一系列的加工(断裂、拼接和修饰)才能变成成熟的RNA。 原核生物和真核生物的tRNA和rRNA转录后的加工方式基本相同,但mRNA转录后的加工存在很大的差别。 (一)mRNA的转录后加工 原核生物的mRNA大多不需要加工,直接翻译成蛋白质,且边转录边翻译。 真核生物mRNA转录的初产物是hnRNA(核不均一RNA),需要经过加工生成成熟的mRNA,包括:5′端加帽、3 ′端加尾、mRNA剪接以及甲基化。 1、5′-端加帽:m7GpppG—— 加帽过程 2、mRNA的剪接 hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA (small nuclear RNA) 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 (并接体, splicesome) snRNA 真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) 非编码区 A~G 编码区1~7 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现,并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 Unit of transcription in a DNA strand Transcript modification 3’ 5’ 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 mRNA的剪接 —— 除去hnRNA中的内含子,将外显子连接。 snRNP与hnRNA结合成为并接体 3、甲基化 在mRNA分子内部有少量的A存在甲基化,而在mRNA前体中不存在这样的结构,需要由甲基化酶催化加工生成。 (二) tRNA的转录后加工 tRNA前体 TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNaseP内切酶 RNaseD外切酶 连接酶 tRNA核苷酸 转移酶 碱基修饰 (2)还原反应 如:U ? DHU (3)核苷内的转位反应 如:U ? ψ (4)脱氨反应 如:A ? I 如:A ? Am (1)甲基化 (1) (1) (3) (2) (4) (三) rRNA的转录后加工 转录 剪接 18S - rRNA rDNA 间隔区 间隔区 28S 5.8S 18S 45S - rRNA 5.8S和28S-rRNA 复习题: 1. 概念 (1)转录 (2)不对称转录 (3)结构基因 (4)核心酶 (5)外显子 (6)内含子 (7)模板链 (8)启动子 (9)核酶 (10)TATA盒 2. 简述转录过程和复制过程的不同点。 3. RNA聚合酶与DNA聚合酶作用的异同点。 4. 试述原核生物启动子的结构特点及功能。 5. 简述真核生物与原核生物转录的不同点。 6. 原核生物与真核生物的转录终止有何不 同? 7. 简述转录起始阶段的几个反应。 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物 ⑵ DNA局部双链解开。 ⑴ RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合。 ⑶ 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物。 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录
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