第4章 DNA复制、突变和损伤修复课件.pptVIP

* China Parmaceutical University 真核细胞DNA复制的起始 * China Parmaceutical University 3.真核细胞DNA复制的终止 端粒酶催化作用下富含G的端粒的产生. 端粒合成的过程: 3‘端DNA为引物，端粒酶自带RNA模板，进行结合、聚合、延伸、移位。 * China Parmaceutical University GGG(TTAGGG)n CCC(AATCCC)n 人DNA端粒结构 重复单位 重复次数 * China Parmaceutical University GGGTTA AAUCCCAAU GGGTTAGGGTTA AAUCCCAAU GGGTTAGGGTTA AAUCCCAAU GGGTTAGGGTTAGGGTTA AAUCCCAAU 5’ 3’ 端 粒 酶 作 用 机 理 * China Parmaceutical University 五、噬菌体、病毒、质粒及线粒体核酸的复制(了解) 双链DNA 单股正链DNA 双链RNA 单股负链RNA 单股正链RNA 病毒 核酸分子的正链与负链： 与mRNA相同的核酸链，称为正链； 与mRNA互补的核酸链，称为负链。 * China Parmaceutical University 这类病毒基因组DNA复制的类型： （1）通过DNA复制过程完成基因组复制。大多数DNA病毒基因组属这种类型。 （2）先转录生成RNA中间体，然后再通过逆转录过程 完成基因组的复制。如乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）。 * China Parmaceutical University φX174, M13，质粒 滚环复制 (1）共价延伸； （2）模板链和新合成的链 分开; （3）不需RNA引物，在正 链3‘－OH上延 （4）只有一个复制叉; * China Parmaceutical University 第一节 DNA的复制 第二节 基因突变 第三节 DNA的修复系统 * China Parmaceutical University 第二节 基因突变 p133 突变的概念 突变的类型 突变原因 自发突变 诱发突变 基因的人工诱变 体外定向突变 p141 * China Parmaceutical University 第一节 DNA的复制 第二节 基因突变 第三节 DNA的修复系统 * China Parmaceutical University 第三节 DNA的修复系统 一、复制修复 主要校正DNA复制过程产生的碱基错误连接,包括尿嘧啶糖基酶系统和错配修复 二、损伤修复 三、复制后修复 四、限制与修饰 * China Parmaceutical University 一、复制修复 1.尿嘧啶糖基酶系统（uracil N-glycosylase) DNA中尿嘧啶的产生:dUTP 掺入和C自发脱氨氧化成U 修复:尿嘧啶N-糖基酶，切断混合尿苷的糖苷键，形成无Pu和Py位点（apurinic or apyrimidinic，AP），再由AP内切酶在AP位点切出一个缺口,聚合酶I填补缺口，连接酶封闭nick。 * China Parmaceutical University 2. 错配修复 DNA错配修复基因是生物进化过程的保守基因,可维持基因组的稳定性 DNA复制产生10-5错配率，其中99%被复制酶校正，剩下的10-7由错配修复系统修复，最后实际突变率只有10-10 。 问题：如何识别哪条是含有错误的新链，哪条是需要保留的母链？ * China Parmaceutical University Mut蛋白识别错配碱基并在新链GATC5’端打开切口,外切酶沿3’ 5’方向切除含错配DNA约1kb,DNA聚合酶III全酶填补空缺，连接酶封闭切口，dam甲基化酶使新链甲基化。 母链上每250bp有一个GATC，dam甲基化酶识别其并在A上甲基化，子链甲基化程度晚些 ，因此有了区别。 错配修复机制 修复系统由mutS,mut L,mut H编码的蛋白,外切酶,DNA聚合酶全酶和连接酶共同组成 * China Parmaceutical University 3. 无嘌呤修复 * China Parmaceutical University 二、损伤修复 胸腺嘧啶二聚体的产生 * China Parmaceutical University 1.光复活（photoreactivation） 光复活酶在暗处与T二聚体结合，蓝光下激活，打开二聚体。 2.甲基转移酶 鸟嘌呤被甲基化成为O6-G, O6-G甲基转移酶去除甲基 3.切除修复（exc