生物化学5-2习题课课件.ppt

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蛋白质结构 蛋白质一级结构—氨基酸顺序 镰形细胞贫血的遗传性疾病,特征是病者的血红蛋白发生变异。 变异的血红蛋白与正常的血红蛋白差异是在一条多肽链上第6位的Glu被Val替代。由于Glu与Val在形成氢键上的差异很大,变异蛋白质的空间结构变化显著,水溶性降低,血液粘度增大,导致贫血症状。 2.蛋白质一级结构的测定 胰岛素的一级结构 1952年英国生化学家Sanger首次测定 结构特点: 1. 由51个氨基酸残基组成 2. 分两条链: A链:21个氨基酸残基 , B链:30个氨基酸残基 3. 含三个二硫链: 一个A链内的二硫键,两个链间二硫键 多肽链氨基酸顺序分析 1.多肽链的选择性降解 酶解法: 胰蛋白酶 化学法: CNBr水解 2.多肽链末端氨基酸的测定 二硝基氟苯(DNFB)法: N端 丹磺酰氯法:N端 阱解法:C端 3.Edman氨基酸顺序法: N端 酶解法 思考题 用胰蛋白酶处理下列小肽,会断裂成什么样的肽片断? Ala-Ser-Thr-Lys-Gly-Arg-Ser-Gly 答案 Ala-Ser-Thr-Lys Gly-Arg Ser-Gly 思考题 今有一个九肽,分别用(1)胰蛋白酶(2)胰凝乳蛋白酶(3)羧肽酶(4)溴化氰处理,试用箭头及号码表示出它们对肽键作用的位置。 Leu-Met-Arg-Pro-Ala-Lys-Tyr-Ser-Arg 思考题 一个肽用CNBr切成两个小肽段,又用胰蛋白酶切成另外两个小肽段。 CNBr1, Gly-Thr-Lys-Ala-Glu CNBr2, Ser-Met 胰蛋白酶1, Ser-Met-Gly-Thr-Lys 胰蛋白酶2, Ala-Glu 推断该多肽的氨基酸顺序. 答案 Ser-Met-Gly-Thr-Lys-Ala-Glu 蛋白质的空间结构(三维结构) 天然活性蛋白质都有稳定的三维结构。一旦这种三维结构遭到破坏,即使一级结构不变,蛋白质的生物功能也会完全丧失。 具有独特的三维结构是蛋白质区别于普通有机分子最显著的特征。 维持主链空间排列的另一个重要因素是氢键。 主链中的-C=O和-N-H-能够相互形成链内或链间的氢键。 蛋白质二级结构主要有: (1)α-螺旋 (2)β-折叠 (3)β-转角 蛋白质的四级结构 具有三级结构的多肽按一定的空间排列方式,通过非共价键缔合在一起形成蛋白质大分子。 蛋白质一级结构和高级结构之间的关系 蛋白质的高级结构是在一级结构的基础上形成的,因此,一级结构的改变必然影响到它的高级结构。 ?-螺旋的形成及其稳定性取决于它的氨基酸组成和排列顺序。氨基酸残基的R基团比较小,不带电荷,有利于?-螺旋的形成和稳定。由于脯氨酸的特殊结构,肽链的主链在脯氨酸所在位置会发生骨架方向变化,不能形成内氢键。因此,多薹链只要存在脯氨酸, ?-螺旋即发生中断。 几种重要的蛋白质类型 球状蛋白 结构最复杂,功能最多的一类蛋白质。 结构紧密,分子外层为亲水性残基;内部主要为疏水性氨基酸残基。 血红蛋白 免疫球蛋白——抗体 结合蛋白质,血浆糖蛋白。主要在脾、肝、淋巴等组织的细胞内合成。 抗体是高等动物免疫反应的产物,是机体防止外界物质侵入的防御物质。当外来的大分子物质,如蛋白质、多糖、核酸以及细菌等侵入机体时,引起抗体的产生,这就是机体的免疫反应。 抗体就是免疫球蛋白,外来的大分子物质就称为抗原。 抗体的特点 1. 高度的特异性: 一种抗体一般只与相应的抗原发生作用,形成抗体-抗原复合物。抗体-抗原复合物一般不溶于水,常从溶液中沉淀出来,称为抗体-抗原沉淀反应。 2. 多样性: 不同的抗原可以诱导产生不同的抗体。抗原种类的多样性决定了抗体的多样性。 抗体蛋白Ig (immune globulin) 人的抗体蛋白分为5类:IgA, IgD, IgE, IgG(含量最高), IgM. 抗体蛋白的相对分子质量范围: 150 000~950 000 习题课 蛋白质 甘氨酸的解离常数是pK1=2.34, pK2=9.60 ,它的等电点(pI)是( )? A、7.26 B、5.97 C 、7.14 D、10.77 维持蛋白质二级结构稳定的主要因素是:? A、静电作用力 B、氢键 C、疏水键   D、范德华作用力 ?蛋白质变性是由于( ) A、一级结构改变   B、空间构象破坏   C、辅基脱落   D、蛋白质水解 4. 在下列所有氨基酸溶液中,不引起偏振光旋转的氨基酸是( ) ? A、丙氨酸   B、亮氨酸   C、甘氨酸   D、丝氨酸 ? 5. 谷氨酸的pK’1(

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