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动物细胞工程 动物细胞培养（基础） 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体制备 动物细胞培养技术 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 * 1.动物细胞工程的基础是什么？ 2.动物细胞培养的基本原理是什么？ 3.动物细胞培养液的主要成分是什么？ 4.进行动物细胞培养的材料一般有何特点？原因？ 动物细胞培养技术 细胞的增殖 通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 一般取胚胎组织或幼龄动物的组织做动物细胞培养。因为胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞分化程度低，分裂能力强。 5.原代培养与传代培养有何区别 ? 6.动物体细胞培养技术能将一个分化的体细胞培养成为一个动物体吗？为什么？ 7.为什么要将组织分散成了单个细胞再进行培养？ 将动物组织消化后的初次培养就是原代培养。 当原代培养的细胞贴满瓶壁后，用胰蛋白酶处理， 制成细胞悬浮液后再次分瓶继续培养就是传代培养 不能，因为高度分化的动物细胞丧失了发育成动物体的能力。 单个细胞容易和周围环境进行物质交换——获得营养物质、氧气等，排出代谢废物； 动物组织 单个细胞 细胞悬液 贴壁生长 分瓶培养 10代细胞 50代细胞 不死细胞 原代培养 传代培养 胰蛋白酶 剪碎 加培养液 接触抑制 少数癌变 少数 动物细胞培养技术流程 畸形分化 8.怎样将动物组织分散成单个的细胞？ 9.胰蛋白酶的作用是什么呢？细胞间隙主要含有什么物质成份？ 10.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来？ 11.细胞贴壁生长对培养容器有何要求？ 将组织剪碎，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。 胰蛋白酶将动物组织细胞间隙中的蛋白质分解，使细胞分散开。 当贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。 培养瓶的内表面要光滑、无毒、易于贴附。 12.传代培养为何要保持10代以内？ 13.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件？ 14.动物细胞培养有何应用价值？（3） 以保持细胞正常的二倍体核型 无菌无毒环境、充足营养（血清或血浆）、温度和PH、气体环境（ O2和CO2作用、方法） ①.大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等； ②.药性、毒性检测； ③.培养基因工程中的受体细胞 细胞的全能性 大量细胞 植株 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 15、植物组织培养和动物细胞培养的比较 动物组织块 细胞悬液 原代培养 传代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞 幼龄动物的器官组织；动物胚胎 动物细胞培养过程 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 加入培养液 用胰蛋白酶等处理贴壁细胞 适宜条件 不死性细胞 1.什么是动物细胞核移植？ 2.动物细胞核移植的原理与类型？ 3.为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞？ 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 动物细胞核的全能性 胚胎细胞核移植和体细胞核移植 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 动物细胞核移植技术 4.体细胞核移植获得高产奶牛过程中，利用了哪些现代生物技术手段？ 5.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？ 6.体细胞核移植技术有哪些应用前景？（4） 动物细胞培养技术、显微操作技术、核移植技术、动物细胞融合技术、胚胎移植技术、 否。绝大部分DNA来自于供体细胞核，但线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 ⑴加速家畜遗传改良的进程 ⑵保护濒危物种 ⑶生产医用蛋白质及组织器官的移植 ⑷了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病 7.体细胞核移植技术还存在什么问题？ ①成功率非常低； ②绝大多数克隆动物还存在健康问题 取供体细胞 取卵母细胞 供体细胞培养 培养到 MⅡ中期 卵母细胞去核 供体细胞注入去核的卵母细胞 重组细胞 重组胚胎 代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体 9.过程： 显微注射 电刺激 物理或化学激活 8、克隆人引发的伦理问题、安全性问题 违反人类伦理道德；冲击现有婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观； 克隆技术还不成熟，克隆人可能存在健康问题；就算身体健康，心理上、社会地位上也难以健全。 治疗性克隆（P49） 需要胚胎移植吗？ 克隆人与治疗性克隆的区别 属于个体水平，目的产生新个体，而治疗性克隆则属于细胞（或组织、器官）