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第四章:细菌和真菌培养细菌和真菌的一般方法配制培养基高温灭菌接种放入培养箱中培养 培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液(或加入琼脂)。不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(生长因子)以及氧气的要求.培养基的类型按物理状态分:固体培养基液体培养基半固体培养基。固体培养基:菌落液体培养基:沉淀生长表面生长均匀混浊生长半固体培养基:无动力 有动力(弥散)用途液体培养基:增菌、工业生产固体培养基:纯化(分离),鉴定、活菌计数、保藏菌种半固体培养基:动力检测灭菌的方法:1、灼烧灭菌2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.菌落:单个或少数同种细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。细菌菌落细菌的菌落特征因种而异 肉眼可以看到的细菌菌落在一个1mm3大小的菌落中,就可含有数十亿乃至数百亿个的个体。真菌菌落大小 形态颜色细菌菌落真菌菌落光滑粘稠或粗糙干燥一般为白色小常呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状红、褐、绿、黑、黄等大细菌科学史相关信息细菌这个名词最初由德国科学家埃伦伯格在1828年提出,用来指代某种细菌。这个词来源于希腊语βακτηριον,意为“小棍子”列文虎克(Antony van Leeuwenhoek,1632–1723)最先使用自己设计的单透镜显微镜观察到了细菌,大概放大200倍。路易斯·巴斯德(Louis Pasteur,1822-1895)和罗伯特·科赫(Robert Koch,1843-1910)指出细菌可导致疾病。列文·虎克自制的显微镜 列文·虎克Antonie van Leeuwenhoek(1632.10.24-1723.08.26 )细菌在等待列文虎克?巴斯德如何知道细菌的来源的?列文虎克用他的显微镜观察细菌的记录原件abefg表示细菌,c,d表示移动,e表示球菌,g表示螺旋菌 发现细菌之后… …鹅颈瓶实验之前… …千百年来,普遍流行着一种所谓“自然发生说”。认为,不洁的衣物会自生蚤虱,污秽的死水会自生蚊蚋,肮脏的垃圾会自生虫蚁。 总之生物可以从它们存在的物质元素中自然发生,而没有上代,古希腊学者亚里斯多德,中世纪神学家阿奎那,甚至连17世纪的大科学家哈维和牛顿,都相信这种学说。约翰·尼达姆他把煮沸的肉汤灌入烧瓶,随即用软木塞盖住,并加封粘胶剂,以防止外来微生物进入。他相信,在煮沸时,必定已把由熬肉汤的肉中的任何微生物都杀灭, 并且也没有任何别的微生物进入这肉汤。因此,当打开烧瓶,过了不几天之后,他发现,烧瓶充满生命有机体。他下结论说:这些微生物必定是自然地在这液体中发生的。斯帕兰扎尼1775年意大利生理学家斯帕兰扎尼通过一系列实验,证明J.T.尼达姆实验结果是由于加热不够和封盖不严所造成,因而确信微生物是从空气带入的。他的观点在当时已接近胜利。但他的批评者宣称,由于他使浸出液在密闭管内煮沸了45分钟,杀死了管内空气中的“活力”,因而影响了自然发生。图片与文字无关。。。意大利 斯巴兰让尼实验密生微生物肉汤煮沸无微生物密生微生物肉汤煮沸巴斯德 为了证实变质肉汤中的细菌是由原来已经存在的细菌产生的观点,巴斯德设计了一个非常巧妙的实验,即著名的鹅颈瓶实验。重做斯帕兰扎尼巴斯德重做了斯帕兰扎尼的实验。他在圆瓶里灌进一些酵母汤,把瓶颈焊封,煮沸几分钟后搁置适当时间。结果表明,瓶里并没有微生物生长。这一试验并不能彻底驳倒自生论者。他们坐在巴斯德的书房里吵吵闹闹:“你在煮沸酵母汤时,把瓶里的空气加热了。酵母汤产生小动物所需要的是自然的空气。你不能把酵母汤和天然的未经加热的空气放在一起而不产生酵母、霉菌、杆菌或小动物!”鹅颈瓶实验巴斯德冥思苦想,决心设计一种只让天然空气进入而不许其中的微生物进入的仪器。在老教授巴拉的指导下,巴斯德终于设计、制作出了符合这一要求的仪器,即著名的曲颈瓶。实验取得了完全的成功。他喜不自胜。在一个有学者、才子、艺术家争相参加的巴黎盛会上,巴斯德讲述了他的曲颈瓶试验,高声宣布:“自然发生学说,经过这简单实验的致命一击之后,绝不能再爬起来了”。不同环境下的鹅颈瓶实验接着,巴斯德又创造性地做了一次大规模的、半公开的实验。他和助手们将煮过的装有细菌培养液的烧瓶分放在多尘的市区、巴黎天文台的地窖里和其他环境中打开。发现空气越是不洁,培养液变质就越快、越严重。这说明使培养液变质的细菌不是自生的,而是来自空气。他推测,海拔越高,空气一定越洁净,培养液受细菌的污染也越轻微。为了验证这一点,他和助手们又先后登上汝
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