霍乱弧菌弯曲菌不发酵G杆菌_培训课件.pptVIP

组织切片染色镜检 组织块经福马林固定、切片经W-S银染色、姬姆萨染色、HE染色和荧光染色等染色后镜检HP，以W-S银染效果最好 免疫组化 用免疫组化法可检出胃粘膜组织切片中的完整HP及破碎的菌体或抗原成分 间接免疫荧光法（IIF） 2．快速脲酶试验 Christensen尿素培养基 将小块的活检组织块放入装有培养基的瓶内，如培养基由黄变为红色为阳性。提示由该菌产生的高活性的脲酶已将尿素分解，结果常在几分钟至24小时内得到 3．核酸检测 现有的方法是从克隆的HP染色体DNA的特异性片段中构建引物 从HP脲酶A基因序列中构建引物 用PCR扩增结合限制性内切酶多态性分析技术鉴别HP 可检测出不能分离培养的HP 4．粪便标本抗原检测 可采用ELISA方法直接测定粪便标本中的抗原。 适用于不能进行13C或14C标记尿素呼吸试验或胃镜检查的患者 （四）分离培养与鉴定 分离培养 宜用新鲜配制的选择培养基。将标本的粘膜面在平板上反复涂擦，或将标本研碎后用研磨棒蘸取适量匀浆接种 将接种后的平板放入微需氧和98%以上湿度的环境培养 鉴定 主要根据菌落特征、形态和染色性；37℃生长；氧化酶和触酶均阳性、脲酶强阳性；对萘啶酸耐药、头孢噻吩敏感；在1%甘油和1%胆盐中均不生长。 （五）抗体检测 用血清学方法检测患者体内的抗HP抗体（IgG、IgM和IgA）系最常用的无创伤性诊断HP感染的方法 目前已有补体结合试验、胶乳凝集试验及ELISA等，而以ELISA应用最为广泛，现有商品化的ELISA、胶乳凝集试验试剂盒 用于检测患者血清中HP的菌体抗体或脲酶抗体 （六）13C或14C标记尿素呼吸试验 基本方法是患者禁食一夜，进食用13C或14C标记的尿素，HP产生的脲酶分解尿素释放带有同位素的CO2，因此可测定患者呼气中释放带有同位素的CO2量，如CO2含量超过标准，提示有HP存在。 该方法敏感性与特异性均很好，只是需要特殊的同位素测定仪。 第九章 非发酵革兰阴性杆菌 概念：一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌。 这一章节中讲述的细菌大多为条件致病菌，某些菌种是引起医院感染的病原体，如： 铜绿假单胞菌 不动杆菌属 产碱杆菌属 黄杆菌属 军团菌属（人类的致病菌） 假单胞菌属分布广泛，人类不发酵菌感染中，假单胞菌占70％～80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌等 第 一节 假单胞菌属 (Pseudomonas) 微生物特性 革兰阴性、无芽胞、专性需氧 有端鞭毛或丛鞭毛 生长温度范围广，最适生长温度为35℃ 产生各种水溶性色素：绿脓素、脓玉红素、荧光素、脓褐素 对理化因素耐受性较强，对多种抗生素耐药 二、铜绿假单胞菌（P. aeruginosa) 1.临床意义：铜绿假单胞菌在自然界分布较为广泛，因此很容易污染器械而造成感染机会 　　　 2.生物学特性 革兰阴性，长短不一 单鞭毛 生长温度25～42℃ 氧化酶阳性 还原硝酸盐、分解尿素、 精氨酸酶阳性 铜绿假单胞菌（P. aeruginosa) 血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味 可产生多种色素： 荧光素与绿脓素 铜绿假单胞菌（P. aeruginosa) 绿脓素 1.肉浸汤 2.胰化酪蛋白 　大豆肉汤 37℃ 培养18－24h 　挑选菌落鉴定 分型 血清学 噬菌体 绿脓素 　　　　初步鉴定 菌落特征、色素、绿脓素：+ 涂片、革兰染色、氧化酶：+ 最后鉴定 生化反应 脑脊液、胸（腹）水、脓液、分泌物、痰、尿液、十二指肠引流液 血液、环境用品 分离培养： 直接涂片革兰染色 粪便 血琼脂平板 SS、麦康凯 分离培养： 37 ℃ 如生长 铜绿假单胞菌检验程序 分类 军团菌属(Legionella) 属于军团菌科（Legionellaceae） 常见的与人类疾病有关的军团菌： 嗜肺军团菌（Legionella pneumophila） 米克戴德军团菌（L. micdadei） 长滩军团菌（L. longbeachae） 杜莫夫军团菌（L. dumoffii） 波兹曼军团菌（L. bozemanii） 第六节 军团菌属 生物学特性 革兰阴性杆菌 菌体呈线状 无芽胞，无荚膜，有端 鞭毛或侧鞭毛 严格需氧 触酶阳性 可液化明胶 不分解糖类 部份菌株氧化酶阳性 临床意义 空气－乳胶微粒传播 引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染 肺炎型：多器官损害，肺部、消化道及神经系统症状及体征，致死率高 医院感染可高达23% 慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病，且死亡率高达45% 微生物检验 分离培养： 营养要求苛刻，生长缓慢 生长温度为35℃