细胞培养技术复习资料(全).docVIP

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细胞培养技术复习资料(全)

名词解释: 细胞组织培养:细胞(组织)培养是指从生物体内取出细胞(组织),模拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定营养条件下,使之生存、生长并维持其结构和功能的方法。 二倍体细胞株:具有二倍体染色体数的细胞株。 细胞组织培养选材:根据实验目的、观察指标确定所选组织器官。培养选材一般来自胚胎组织的培养物;比成体组织更易生存和生长。这主要是因为胚胎组织有更多的胚胎组织干细胞,它们具有更高的自我更新和多能分化能力。 原代培养:一般指从组织中分离在体外生长至传代之前的细胞培养。这种培养通常是异质性,生长缓慢,但比较能代表原组织的类型并表达原组织特性。缺点是在培养过程中会失去许多原组织的细胞。 传代细胞:原代细胞生长物或细胞系生长到一定阶段,分散成单个细胞,按一定比例接种于新的培养容器内称之传代。传代细胞称之细胞系,可分为两类:有限细胞系和连续细胞系。传代形成的具有各自生物特性或标志的细胞系称之为细胞株。 世代:指细胞经过一次分裂后完成后至下次分裂的过程。 细胞富集:当细胞分离纯化并不完全彻底,培养物中能达到以某种细胞为主(占绝大多数)的程度。 细胞纯化:是指从原代培养前成分混杂的异质性细胞悬液中或者从培养物中获得单一类型细胞的过程。通过细胞分离和纯化得到细胞株或系。 传代:也称为再培养,把一瓶培养细胞全部或分成几份再培养的过程。 组织工程:组织工程是应用生命科学和工程学的原则及方法,在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上,研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的生物替代物的一门新兴学科。 Density inhibition: 密度抑制,由于细胞密度过大,培养液营养耗尽、代谢产物过多和生存空间消失所引起细胞增殖的抑制现象。 消化液:在原代细胞培养和细胞传代时,都要用消化液,最常用的是胰蛋白酶和二乙烯四乙酸二钠(EDTA),其次是一些特殊的组织细胞培养用的各型胶原酶。在原代细胞培养中,使用消化液从组织块中分离(散)出单个的细胞;在进行细胞传代时,消化液使细胞脱离生长表面并离散成单个细胞。 平衡盐溶液(BSS):集缓冲能力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体,兼具维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度,同时供给细胞生存所需的能量和无机离子成分的作用,常用的BSS有PBS、Hanks等。 清洁液:是一种不含磨蚀性物质,能迅速清除物品上污垢,分解脏污,令物品透明亮如的清洁用品。通过某个转化过程形成的,常由于染色体断裂变成异倍体,失去正常细胞特点,而获得无限增殖能力。转化细胞系具有长期培养,倍增时间短,对培养条件和生长因子等要求较低的特点,适于大规模工业化生产。B淋巴细胞杂交瘤技术,即将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,以建立可以分泌单一性抗体的杂交瘤细胞系的技术。 杂交瘤细胞:指肿瘤细胞与体细胞融合形成的杂交细胞,它既保留了肿瘤细胞无限繁殖的能力,有具有参与融合的体细胞的一些特征。 克隆:指通过一定方法获得由单个细胞无性繁殖形成的细胞集落。 单克隆抗体(McAb):B淋巴细胞在抗原刺激下能增殖分化,转变成产生抗体的浆细胞,若将单个产生特质性抗体的B淋巴细胞分离出来,使之在体外分化增殖,产生一大群即一个克隆的细胞,这样便可得到大量的、结构相同的、均一的、针对抗原某一决定簇的抗体,这样由一个克隆B淋巴细胞产生的抗体又称为单克隆抗体。 干细胞:干细胞是人体内最原始的细胞,它具有较强的再生能力,在干细胞因子和多种白细胞介素的联合作用下可扩增出各类的细胞。其生物学特性有:1.多能性2.自我更新能力3、高度增殖能力 群体倍增时间:细胞指数增长期时,细胞群倍增所需的时间 密度抑制(density inhibition):由于细胞密度过大,培养液营养耗尽、代谢产物过多和生存空间消失所引起细胞增殖的抑制现象 生长基质:培养皿表面包被的这层能改善生长表面的特性,促进细胞粘附和贴壁的物质。即生长基质 问答: 简述体外培养细胞的主要生物学特点。 答:体外培养细胞的生物学特点:(1)去分化:体外培养,分化特征逐渐减弱,使细胞结构与功能上的“可塑性”增大 (2)贴壁铺展:粘附于固相表面是锚定依赖性细胞生命活动的基本要求。细胞被接种到培养器皿内以后首先要发生粘附,是细胞培养以后能否成功的第一步.提供什么样的生长表面是细胞能否成功粘附的主要因素。铺展是进行生命活动的一种基本的生长特点或生长行为铺展状况制约细胞的分裂增殖活动过程,细胞先由圆形变为圆饼形(放射状铺展细胞)逐渐铺开伸展成为扁平的极性细胞。极性细胞就是各种有机体细胞是在体外的特征性细胞形态(3)接触抑制和密度依赖性生长抑制:细胞生长有密度抑制,血清可降低密度抑制,转化细胞可降低密度抑制 简述成体干细胞的定义与特点。 答:成体干细胞是指存在于一种已经分

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