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血凝仪
血 凝 仪血凝仪,即血液凝固分析仪,是对血栓和止血进行实验室检查的仪器。止血与血栓分子标志物的检测指标与临床各种疾患有着密切联系,如动脉粥样硬化,心脑血管疾病、糖尿病、动静脉血栓形成,血栓闭塞性脉管炎、肺栓塞、妊娠高血压综合症、弥散性血管内凝血、溶血尿毒综合症、慢性阻塞性肺炎等。中医药关于活血化瘀的理论与治疗工作研究也都涉及止血与血栓问题。使用血凝仪对血栓和止血进行实验室检查成为必要。血凝仪分为全自动与半自动两类。简介 目前国内外各生产厂家生产的半自动血凝仪都是基于凝固法对血液凝固过程进行测量的。血液凝固是一系列凝血因子连锁性酶反应的结果。血液中的凝血因子以无活性酶原形式存在,当某一凝血因子被激活后,可使许多凝血因子按一定的次序先后被激活,彼此之间有复杂的催化作用,被称为“瀑布样学说”。这种“瀑布样学说”产生的激变在血液的生物物理特性上表现为,电阻增大(电流法)粘度增强(磁珠法),浊度上升(光学法)。由于电流法测量可靠性差,因此为磁珠法和光学法所替代。 利用血凝仪进行血栓与止血的实验室检查,可为出血性和血栓性疾病的诊断、溶栓以及抗凝治疗的监测及疗效观察提供了有价值的指标。随着科学技术的日新月异,血栓与止血的检测从传统的手工方法发展到全自动血凝仪,从单一的凝固法发展到免疫法和生物化学法,血栓与止血的检测也因此变得简便、迅速、准确、可靠。血凝仪的发展概况 1910年Kottman发明了世界上最聚早的血凝仪,通过测定血液凝固时的粘度的变化来反应血浆凝固的时间。 1922年,Kugelmass用浊度计通过测定透射光的变化来反应血浆凝固时间。 1950年,Schnitger和Gross发明了基于电流法的血凝仪。 60年代,机械法血凝仪得到开发。 70年代以后,由于机械、电子工业的发展,使各种类型的全自动血凝仪先后问世。 80年代,由于发色底物的出现并应用于血液凝固的检测,使全自动血凝仪除了可以进行一般的筛选试验外,尚可以进行凝血、抗凝、纤维蛋白溶解系统单个因子的检测。 80年代末,双磁路磁珠法的发明给血栓与止血的检测带来新概念,由于其独特的设计原理,使光学法检测的一些影响因素在本类型的检测仪器上均不复存在。 90年代,全自动血凝仪免疫通道的开发又为血栓与止血的检测提供了新的手段。血凝仪的基本原理目前可开展的血栓/止血成份检测方法主要有凝固法、底物显色法、免疫法、乳胶凝集法等。在表中可注意到,在血栓/止血检验中最常用的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、内源凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、蛋白C、蛋白S等均可用凝固法测量。所以目前半自动血凝仪基本上都是以凝固法测量为主,而在全自动血凝仪中也一定有凝固法测量。 凝固法中又可分为光学法和磁珠法两类。由于光学法几乎可涵盖各种检测方法,为了降低仪器制造成本,全自动血凝仪以光学法居多。但也有少数高级全自动血凝仪中凝固法测量采用无样品干扰的双磁路磁珠法,而其它测量采用光学法,并可同时进行检测。测定项目 凝固法 底物 显色法 乳胶 凝集法 ELISA 凝血酶原时间(PT) ● 活化部分凝血活酶时间(APTT) ● 凝血酶时间(TT) ● 纤维蛋白原(FIB) ● 外源性凝血因子II、V、VII、X ● ● 内源性凝血因子VIII、IX、XI、XII ● ● 凝血因子VIII ● 肝素 ● ● 低分子量肝素 ● ● 抗凝血酶III(AT-III) ● ● 蛋白C(PC) ● ● ● 蛋白S(PC) ● ● ● 血栓调节蛋白(Thromodulin) ● ● 活化蛋白C抵抗性(APC-R) ● 纤溶酶原(PLG) ● α2抗纤溶酶(α2-AP) ● 补体1脂酶抑制物(CI) ● 组织纤溶酶原激活物(t-PA) ● ● 纤溶酶原激活物抑制物(PAI) ● ● 纤维蛋白单体 ● 纤维蛋白降解产物(FDP) ● ● D-二聚体(D-Dimer) ● ● 纤维蛋白肽A(FPA) ● 凝血酶原断片1+2(F1+2) ● 测定方法 光学法(比浊法) 光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。根据仪器不同的光学测量原理,又可分为散射比浊法和透射比浊法两类。 散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90O直角,当向样品中加入凝血激活剂后,随样品中纤维蛋白凝块的形成过程,样品的散射光强度逐步增加。当样品完全凝固以后,散射光的强度不
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