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细胞生物学实验教学大纲 一、本课程的目的、任务： 配合细胞生物学理论课的讲授，通过一系列的实验，使学生能对理论知识有更深，更直观的理解，同时掌握一些基本的细胞实验技能，了解有关细胞工程采用的手段和方法，为进一步深造和独立开展科研工作打下良好的基础。 二、说 明： 本大纲前10个实验为必作实验，其余根据实验条件选作，每实验为3学时，共计30学时。 三、教学内容： 实验一 普通光学显微镜的结构及主要性能 目的与要求：掌握普通光学显微镜的结构、原理并能熟练操作 实验仪器与材料：普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、香柏油、生物制片标本、滤 纸、擦镜纸 主要内容：通过对生物制片标本的观察掌握普通显微镜的使用 实验步骤：1.熟悉检查→清洁→.光路调中及合轴调节→镜口率的配合,滤光片的选择→.油镜的使用→清洁 作业: 1.写出正确使用显微镜的操作步骤。(包括油镜的使用) 2.为什么要进行镜口率的配合？ 实验二 相差显微镜的结构、原理及其用法 目的与要求：1.熟悉相差显微镜的构造及其原理 2.掌握相差显微镜的操作方法 3.观察记录未染色的活体组织和细胞的结构 主要内容：相差显微镜的操作方法 实验仪器与材料：相差显微镜(包括附件)、载玻片、盖玻片、牙签等. 实验步骤：.样品的制备→熟悉结构→调节→观察 作业：1. 相差显微镜中所观察的象与普通显微镜中的象有何不同? 2. 相差显微镜中与普通显微镜结构有何不同? 3.环状光阑、相板各起何作用? 4.为何采用绿色滤光片? 5.为什么进行合轴调节? 6. 相差显微镜的正确操作步骤? 实验三 偏光、暗视野显微镜的原理、结构及使用 目的与要求：1.了解并掌握特殊显微镜的构造及原理 2.熟练掌握其操作方法 3.熟悉并掌握其应用领域 主要内容：熟练掌握偏光及暗视野显微镜的操作 实验仪器与材料：偏光显微镜、暗视野显微镜、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸、棉花等 实验步骤：样品的制备→调节→观察 作业：1.为什么物镜NA要小于聚光器NA? 2.为什么要把聚光器调到视野中只有一个清晰的亮点,并且调到中央? 3. 偏光及暗视野显微镜正确的操作步骤是什么,你在操作中遇到哪些问题,如 何解决? 实验四 倒置、电视生物显微镜 目的与要求：1.了解并掌握倒置、电视生物显微镜的构造及原理 2.熟练掌握其操作方法 3.熟悉并掌握其应用领域 主要内容：掌握倒置显微镜及电视生物显微镜操作方法 实验仪器与材料：倒置显微镜、电视生物显微镜、生物切片 实验步骤：（一）倒置显微镜 熟悉安装各部件→光路调中→放置标本→调焦→观察→记录 （二）电视生物显微镜 .监视器、摄像机、录象机及显微镜的连接→放置标本→调节观察→录制 作业：1.倒置显微镜为何要将聚光器与物镜倒换? 2. 电视生物显微镜与其它特殊显微镜比较有何优点? 实验五 荧光显微镜的操作方法 目的与要求：1.了解荧光显微镜的光学原理，结构特点及应用领域 2.掌握荧光显微镜的操作方法 3.观察叶绿体的荧光特性 主要内容：.掌握荧光显微镜的操作方法 实验仪器与材料：荧光显微镜、绿色植物 实验步骤: 熟悉各部件→.打开开关→按下高压启动按钮→调节→放置标本→调焦→观察 作业：1.激发滤光片与阻断滤光片是否可以随便选用,为什么? 2.正确的操作步骤是什么? 实验六 生物活体染色——观察液泡系及线粒体 目的与要求：1.掌握活体染色技术的原理及方法 2.观察并记录动、植物细胞的液泡及线粒 主要内容：掌握活体染色技术的原理及方法 实验仪器与材料：解剖器械、Ringer氏液Janus greenB、中性红、蟾蜍、黄豆幼苗根尖、兔子、洋葱、载玻片、盖玻片、培养皿等 实验步骤：样品的制备→染色→观察 作业：绘出你所观察到的动植物液泡及线粒体 实验 细胞的显微测量 掌握显微测撤计的基本原理及使用方法。人血涂片蟾蜍血装片掌握显微测撤计的使用方法显微镜、目镜微尺、镜台微尺、解剖剪、解剖镊、注射器、载玻片、盖玻片、试管、无采血针生理盐水、瑞氏(w)染色液 长度测量厚度测量 作业测五十个红细胞长径，求其平均值。实验 死活细胞鉴别 学习并掌握死活细胞鉴别的原理及方法。 染色排除法鉴别死活细胞 荧光