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仪器分析方法的评价指标 吸收峰:曲线上吸光度最大的地方,它所对应的波长称最大吸收波长(λmax)。 谷:峰与峰之间吸光度最小的部位,该处的波长称最小吸收波长(λmin)。 肩峰(shoulder peak):在一个吸收峰旁边产生的一个曲折。 末端吸收(end absorption):只在图谱短波端呈现强吸收而不成峰形的部分。 朗伯—比耳定律数学表达式 吸光系数的几种表示方法 紫外—可见分光光度计基本组成 3. 样品室 原子吸收与分子吸收 相同点:都属吸收光谱,遵守比尔定律。 不同点:吸光物质状态不同(分光光度法:溶液中的分子或离子;AAS:气态的基态原子);分子吸收为宽带吸收(带状光谱),而原子吸收为锐线吸收(线光谱)。 原子吸收分光光度计由光源、原子化系统、分光系统和检测系统四部分组成。 光源的功能是发射被测元素的特征共振辐射。 原子化系统的功能是提供能量,使试样干燥、蒸发和原子化。 分光系统的作用是将所需要的共振吸收线分离出来。 检测系统将光信号转换为电信号后进行显示和记录结果。 原子化系统 原子化器的功能是提供能量,使试样干燥、蒸发和原子化。入射光束在这里被基态原子吸收,因此也可把它视为“吸收池”。 常用的原子化器有火焰原子化器(原子化效率低)和非火焰原子化器(原子化效率较高)。相应的原子化方法有火焰原子化法和非火焰原子化法。 石墨炉原子化器结构(原子化效率高) 石墨炉的基本结构包括:石墨管、炉体(保护气系统)、电源等三部分组成。 一次分析过程是经历干燥、灰化、原子化和净化等四个阶段。 根据所使用的流动相和固定相的极性程度,将其分为正相分配色谱和反相分配色谱。 正相分配色谱normal phase:采用流动相的极性小于固定相的极性,它适用于极性化合物的分离。其流出顺序是极性小的先流出,极性大的后流出。 反相分配色谱reverse phase:采用流动相的极性大于固定相的极性。它适用于非极性化合物的分离,其流出顺序与正相色谱恰好相反。 主要部件(main assembly of HPLC) 分离系统——色谱柱 色谱柱是液相色谱的心脏部件,它包括柱管与固定相两部分。 柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有限,故金属管用得较多。 一般色谱柱长10~30cm,内径为4~5mm,凝胶色谱柱内径3~12mm,制备柱内径较大,可达25mm 以上。 载体类型 可分为硅藻土和非硅藻土两类。 红色担体是将硅藻土与粘合剂在900℃煅烧后,破碎过筛而得,因铁生成氧化铁呈红色,故称红色载体。它适宜于分析非极性或弱极性物质。 气相色谱检测器 根据检测原理的不同,可将其分为浓度型检测器和质量型检测器两种: (l)浓度型检测器 测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化,即检测器的响应值和组分的浓度成正比,与单位时间内组分进入检测器的质量无关。如热导检测器TCD和电子捕获检测器ECD 。 (2)质量型检测器 测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化,即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的量成正比。如火焰离子化检测器FID和火焰光度检测器FPD等。 (l)归一化法 归一化法是气相色谱中常用的一种定量方法。应用这种方法的前提条件是试样中各组分必须全部流出色谱柱,并在色谱图上都出现色谱峰。当测量参数为峰面积时,归一化的计算公式为 * 精密度 S Sr 准确度 E Er 选择性 标准曲线 线性范围 灵敏度 检出限 1.吸收峰 2.谷 3.肩峰 4.末端吸收 紫外-可见吸收光谱法 根据物质分子对200~760nm这一范围的光的吸收特性建立起来的定性、定量和结构分析的方法。 A=-lg(It/I0 εb c 式中A:吸光度;描述溶液对光的吸收程度; b:液层厚度 光程长度 ,通常以cm为单位; c:溶液的摩尔浓度,单位mol·L-1; ε:摩尔吸光系数,单位L·mol-1·cm-1; 透光率T : 描述入射光透过溶液的程度: T I t/ I0 吸光度A与透光率T的关系: A = -lg T C ---mol / L ε---摩尔吸光系数 L · mol –1 · cm -1 C--g / L a---吸光系数 L · g –1 · cm -1 C--g / 100 mL E1%1cm---比吸光系数 100mL · g–1 · cm -1 ?、 a、 E1%1cm之间的相互换算: 摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度; 吸光系数a L·g-1·cm-1)相当于浓度为1 g/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度; 比吸光系数指物质的质量分数为1%,液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 某一溶
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