山东大学 细胞膜的通透性.docVIP

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一、实验名称 的渗透性、 1、了解细胞膜的渗透性原理以及各类物质进出细胞的方式。 3、比较不同大小或不同溶解性的 三、1、细胞膜的选择: 2、溶血现象:溶血是指现象。 3、不同物质的溶血速度: :脂溶性越大的分子越容易穿膜 小分子比大分子容易穿膜 非极性物质比极性物质越容易穿膜; 的分子容易穿膜。 (1)等渗溶液,%的NaCl溶液。),%的NaCl溶液。) (4)),也和甲醇相似,脂溶性大分子,分子量更大,溶血时间更长。)TritonX-100一种非离子型去垢剂 四、实验 1、材料 鸡血。 2、试剂 0.85%NaCl溶液、0.085%NaCl溶液、0.8mol/L甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、6%葡萄糖溶液、2%TritonX-100 3、器材 离心管、试管架、滴管、显微镜。 五、实验过程 2、将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%浓度(已完成),每组左右 (1)0.85%NaCl溶液 (2)0.085%NaCl溶液 (3)0.8mol/L(0.3mol/L等渗)甲醇溶液 (4)0.8mol/L(0.3mol/L等渗)丙三醇溶液 (5)6%(5%等渗)葡萄糖溶液 (6)2%(1.5%等渗)TritonX-100 4、小组各成员分工合作,离心管,每对比一次颜色,镜检一次细胞对于葡萄糖,每,每观察一次细胞时间为即可。 拍照记录,清晰装片,整理 六、实验结果 : 等渗与低渗 甲醇与等渗 等渗与TritonX-100 等渗与葡萄糖30分钟 等渗与葡萄糖60分钟 等渗与甘油20分钟 等渗与甘油40分钟 等渗与甘油60分钟 2、镜检结果:: 10分钟 20分钟 30分钟 40分钟 50分钟 60分钟 葡萄糖: 20分钟 40分钟 60分钟 (3)甲醇: (4)低渗: (5)TritonX-100: (6)等渗: 3、破裂过程展示 4、溶血速度比较表: 速度 溶血所需 要的时间++ 5s 溶液透明,颜色鲜红,由于浓度较大,细胞完全溶血? 3 0.8mol/L甲醇 完全溶血 +++ 16s 前期细胞不完全溶血,然后细胞完全溶血 4 0.8mol/L丙三醇 不完全溶血 + >1h 部分细胞先溶血,随着时间的增加,溶血细胞逐渐增加先溶血,随着时间的增加,溶血细胞逐渐增加6%Triton?X-100? 完全溶血 ++ 10s 表面活性剂,结果不明显,溶液浑浊,但颜色鲜红 实验结果分析 0.85%?NaCl溶液与鸡血细胞是等渗溶液,所以不能溶血。 2、0.085%?NaCl溶液为低渗溶液,能够使红细胞吸水涨裂。浓度越低,与细胞的渗透压相差越大,渗透作用越强,越容易发生溶血。水分子引起细胞溶血的速度最快,是由于细胞膜上有水孔蛋白的存在,由于有水孔蛋白参与了水分子的易化扩散,其进入细胞的速度远比水分子的简单扩散快得多。 3、血细胞在相同浓度的甲醇,丙三醇,葡萄糖中都能溶血,但是时间不同,甲醇最快,其次是丙三醇葡萄糖最慢。 4、非离子型去垢剂TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团,主要与蛋白质疏水部位相互作用,不会引起蛋白质变性,从而是红细胞内物质渗出,发生溶血现象,溶血速度相对较快。 溶血速度的因素: 细胞变透明的? 遮光能力 7、溶血细胞悬液红的原因? 后,内容物流出,血红蛋白流出,直接暴露在视野下,没有细胞膜的遮挡,所以会变红。 、总结改进 1、甲醇溶血太快,可以提前调整好显微镜的焦距,以免在调节的过程中浪费时间另外要通过小组合作完成,避免操作是取放物品浪费时间。 3、即使细胞在等渗溶液中短时间内未发生溶血现象,但是细胞长时间处于等渗溶液中也会发生溶血现象。 4、条件允许的话,可以使用可以自动拍照的显微镜,拍照迅速、清晰、准确。 5、可以继续研究加入氯化钾、硝酸铵的强弱电解质对溶血的影响,研究细胞膜的通透性。 附件:细胞溶血视频以甲醇为例) gif 山东大学实验报告 2016年 310 日

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