第33讲选修基因工程概念.pptVIP

体外基因治疗与体内基因治疗的比较: 比较项目 体外基因治疗 体内基因治疗 成果举例 用腺苷酸脱氨酶基因治疗复合型免疫缺陷病 用正常基因治疗遗传性囊性纤维化病 过程 取患者的淋巴细胞→细胞培养→将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞中→筛选→将导入成功的淋巴细胞转入患者体内 用经过修饰的腺病毒作载体结合正常基因,构建基因表达载体→导入患者肺组织中 特点 操作复杂,成功率高 操作简单,成功率低 【通关题组】 1.(转基因动植物的培育)(2014·滁州模拟)下图表示转基因动植物的培育过程。下列有关叙述正确的是　(　　) A.通过③过程培育转基因抗虫棉依据的原理是基因重组 B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在绵羊细胞内是否成功表达 C.受体细胞A、B均是受精卵 D.外源基因能在绵羊、棉花细胞内表达,说明遗传密码在不同种生物中可以通用 D 考纲 考情 三年22考　高考指数:★★★★★ 1.基因工程的诞生　Ⅰ 2.基因工程的原理及技术　Ⅱ 3.基因工程的应用　Ⅱ 选修3 -1　 基因工程 辨析： 1.限制酶只能用于切割目的基因。 2. DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。 3.E·coliDNA连接酶既可以连接平末端,又可以连接黏性末端。 4.质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体。 5.载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达。 6.蛋白质工程可按照人的意愿生产出自然界中不存在的蛋白质。 7.蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。 × × × √ √ √ √ 【网络概览】 一、基因工程的概念 项　目 具体内容 别　名 基因拼接技术或DNA重组技术 供　体 提供_________ 原　理 _________ 操作环境 生物体外 操作水平 _________ 受　体 表达目的基因 结　果 获得_____________的新的生物类型和生物产品 优　点 克服_______________的障碍;_________生物性状 目的基因 基因重组 分子水平 符合人们需要 远缘杂交不亲和 定向改造 ？不同生物的基因能拼接 不同生物的基因具有相同规则双螺旋结构，基本单位均为脱氧核苷酸,均遵循碱基互补配对原则 ？一种生物的基因能在另一种生物体内表达 所有生物共用一套遗传密码，均遵循中心法则 考点一 基因工程的工具? 1.工具酶与其他酶: (1)来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。 (2)作用：识别特定的 并切开相应两个核苷酸之间的 。 (3)结果：产生 或平末端。 限制酶的解读 ①识别序列的特点:呈现碱基互补对称,无 论是奇数个碱基还是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线。如图,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 原核 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便于进行检测 当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端，在中轴线处切开时,产生的则是平末端。 E·coli DNA连接酶：只能连接_________ T4 DNA连接酶：既能连接_______,又能连接_______ (3)限制酶与DNA连接酶的关系(如下图): 2.DNA连接酶——“分子缝合针”: (1)作用:将切下来的________拼接成新的DNA分子。 (2)种类 DNA片段 黏性末端 黏性末端 平末端 (3)五种酶的比较: 　　　项目 种类　　　 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成黏性末端或平末端 DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 连接DNA分子片段 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 形成新的DNA分子 DNA(水解)酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸 DNA解旋酶 DNA分子 氢键 形成单链DNA分子 3.载体: (1)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (2)作用： ①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (3)具备的条件： ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有一个至多个限制酶切割位点,以便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因,以便进行筛选。 一种裸露、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。 【高考警示】 用限制酶切割时需注意的事项 (1)获取目的基因和切割载体时,经常使用同一种限制酶(也可使用能切出相同末端的不同限制酶),目的是产生相同的黏性末端或平末端。 (2)获取一个目的基因需限制酶切割两次,共产生4个