柑橘10-31.docVIP

实验方案 1．1 果皮的预处理 将柑橘皮于30-40℃恒温干燥，粉碎至颗料尺寸1-2mm，备用。 1. 2 碱提酸沉法提取，超声波辅助 1．2.1 粗提取 称取10.0g 柑橘皮用水洗涤至无色，滤干，在25℃下，用40.0g 饱和石灰水浸泡40min，用超声波发生器超声辐射30min，再用浓度为5mol/L 氢氧化钠溶液调节pH = 13.0，减压抽滤除去橘皮渣，滤液用浓度为1mol/L 盐酸溶液中和至pH= 4.5，待晶体析出，过滤，70℃干燥, 得粗橙皮甙。 1.2.2 精提 将粗品用质量分数为1% 氢氧化钠溶液及50%乙醇溶液(1∶1) 混合溶液50mL 溶解，过滤，滤液再用浓度1mol/L 盐酸溶液调pH= 5.0，收集沉淀物，先用质量分数为50% 乙醇溶液洗涤1 次，再用水洗至接近中性，70℃干燥，即得橙皮甙。 1.2.3 标准曲线的绘制 精确称取橙皮甙对照品10 mg，置于100 mL容量瓶中，加体积分数70 %甲醇溶解至刻度，摇匀即得对照品溶液。分别精密吸取0. 1 g/L橙皮甙标液0.0，2.0，4.0，6.0，8. 0 ，10. 0 mL 置于6 个25mL 具塞试管中，70 %甲醇溶液补充至10mL，加入5 % NaNO2 溶液0.8 mL , 摇匀，放置6 min，再加入10 %Al (NO)30. 8 mL，摇匀，放置6 min ，加入4 %NaOH 溶液10 mL , 摇匀，放置15 min，以蒸馏水定容至刻度。以一号为空白，光程1 cm，在510 nm处测定各管的吸光度值，用最小二乘法做线性回归，求得橙皮甙质量浓度C (g /L) 与吸光度( A) 的关系。 得到标准曲线方程： 相关度：R2 1.2.4.橙皮甙含量的测定 称取10mg橙皮甙样品，置于100 mL容量瓶中，加体积分数70 %甲醇溶解至刻度，摇匀。分别精密吸取0. 1 g/L橙皮甙2.0，4.0，6.0，8. 0 ，10. 0 mL 置于6 个25mL 具塞试管中，70 %甲醇溶液补充至10mL，加入5 % NaNO2 溶液0.8 mL , 摇匀，放置6 min，再加入10 %Al (NO)30. 8 mL，摇匀，放置6 min ，加入4 %NaOH 溶液10 mL , 摇匀，放置15 min，以蒸馏水定容至刻度。以一号为空白，光程1 cm，在510 nm处测定各管的吸光度值。比较标准曲线，得样品中橙皮甙的含量。 1.2.5单因素实验 （1）超声提取温度(A ) 25℃、35℃、45℃、55℃、65℃、75℃ 通过含量检测得到曲线： （2）超声提取时间(B ) 15、20、25、30、35、40 通过含量检测得到曲线： (3)料液比 1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1：7 通过含量检测得到曲线： 1.2.6 　正交实验 从柑橘皮中提取橙皮甙，影响超声提取收率的主要因素为: 超声提取温度(A )、超声提取时间(B )、饱和Ca (OH) 2 水溶液与柑橘皮的质量比(C)。以测得的橙皮甙提取率为评价指标, 为优化提取条件采用正交法设计实验, 选用三因素三水平正交实验表L 9 (33) , 见表1。正交实验设计。 表1　因素水平表 水平因素A (℃)B ( t/min)C (物料比) 25152∶1 50304∶1 75457∶1表二 水平因素A（T/℃）B(t/min)C(物料比)125152:1225304:1325457:1450152:1550304:1650457:1775152:1875304:1975457:1