常用免疫测定方法的原理和质量详解.ppt

常用免疫测定方法的原理及其测定质量问题;非标记免疫分析：补体结合试验 ，免疫速率散射比浊测定 标记免疫分析：放射免疫法 、酶标记免疫法 、荧光免疫法、发光免疫法、电化学发光免疫 定量免疫免疫分析中的质量问题 1、工具抗体 2、包被（反应载体及其抗原或抗体的包被 ） 3、标记物 4、校准 5、基质效应;从定性试验到定量测定;补体结合试验，曾经最敏感;免疫速率散射比浊测定;;标记免疫分析;放射免疫法（同位素碘125标记）;Rosalyn Yalow (1977获诺贝尔奖）;标记免疫的发展;酶标记免疫法 ;酶标记免疫法：发光底物法 ;酶（标记）化学发光免疫分析;荧光（fluorescence）;磷光（phosphorescence ）;化学发光(chemiluminescence);;荧光免疫法 ;时间分辨荧光免疫分析;时间分辨荧光免疫分析;荧光偏振免疫测定;荧光偏振免疫分析;发光免疫法;化学发光免疫分??;电化学发光免疫;工作电极(阳极)上一定的电压能量作用下，二价三联吡啶钌释放电子发生氧化反应而成为三价的三联吡啶钌，同时，电极表面的三丙胺（TPA）也释放电子发生氧化反应而成为阳离子自由基 TPA+ ，并迅速自发脱去一个质子而形成三丙胺自由基 TPA·;定量免疫分析中的质量问题 ;工具抗体 ;包被 （coating);标记物;校准(caliberation);校准品的赋值;校准(caliberation);校准(caliberation);拟合(normalization);基质效应;定量免疫分析的质控方法;新世纪是否存在实验室质量问题？;2000年第一次内分泌室间质量评价总结;2001年第二次内分泌室间质量评价总结(除外3s);2002年第二次内分泌室间质量评价总结(除外3s)化学发光的结果;2003年第一次内分泌室间质量评价总结中催乳素(PRL): (除外3s)各种方法的结果;2003年第二次内分泌室间质量评价总结中催乳素(PRL): (除外3s)各种方法的结果;2002年第二次内分泌室间质量评价总结中催乳素(PRL): (除外3s)各种方法的结果; Quality Control is not something to be performed without thought. There is no single way to do QC, and the notion that 2 SD limits are the standard QC practice is both out-dated and wasteful. Dr. Westgard 质量控制并非不假思索便可成就，也没有独一无二的“做质控” 方法，以为2SD界限就是标准质控的观念看来既过时又浪费。 韦斯特伽德 博士;临床质量管理的历史;实验室质量管理的历史发展过程;;;临床实验室QC模式的演进;Levey-Jennings图;;Westgard 多规则QC;;;;;;;;;个性化设计的QC;;QC能否保证测定方法可接受;;;;We expect one run out of 20 (5%) to fall between 2 and 3 SD from the mean.;When most data points fall within +/- 1 SD, the assigned SD is much higher than the actual observed value. ;A significant increase in random error does not generate a QC flag when the ASSIGNED SD is significantly higher then the ACTUAL value.;;; The calculated mean and SD are incorrect if the data include two populations with different means. ;;The calculated SD is incorrect if the data include two populations with different SDs.;;6-Sigma 质量管理;;; Cpk = (可接受规格 - bias)/3s?? ;;质控图的几点要求;解决办法;解决办法;;临床免疫QC的几