第2章天然产物的提取分离和结构鉴定技巧.ppt

天然产物化学;一、天然产物化学成分的预试验与提取;实际工作中：采用石油醚（非极性物质）、水（极性物质）、95%乙醇（大部分成分）的三段法进行粗分，提高工作效率。;;预试验方法要求简便、快速，并要有尽可能的正确性。 试管试验及滤纸片法。 层析方法（PC和TLC）：灵敏度高、成分之间互相干扰小。;预试验往往只能提供初步的线索;咖啡碱属于生物碱，但对碘化铋钾试剂却呈阴性反应。 有些预试验方法是该类化学成分需要先经过一步反应，生成的产物再与试剂显颜色反应。如：氰苷的预试验方法是利用氰苷遇酸水解生成HCN，再与苦味酸NaCO3溶液反应显红色。;;由于植物内各种成分的含量很低，尤其是某些生理活性物质含量更低，运用一般的预试验方法是很难发现的。如：美登素（抗肿瘤药物） 新类型的化学成分靠目前的预试验方法无法检测。 ;系统分离是选择一系列措施，将性质相近的组分集中在一起提取出来，并分别与临床、动物实验相配合，确定该部分是否有效，对有效部分视具体情况再进行分离，找出关键成分，这是系统分离的目的。;系统分离包括粗分阶段和细分阶段： 粗分阶段又称作部位分离，大类物质的分离，如皂苷、蛋白质；细分阶段称作组分分离。 系统分离亦利用溶剂极性的大小对植物成分进行分类提取。;;1. 溶剂法 ;化合物的极性与其分子结构有关; 化学成分的极性：被提取成分的极性是选择提取溶剂最重要的依据。 影响化合物极性的因素： (1) 化合物分子母核大小（碳数多少）：分子大、碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。 (2) 取代基极性大小：在化合物母核相同或相近情况下，化合物极性大小主要取决于取代基极性大小。 常见基团极性大小顺序如下；酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷。 举例：判断下列各组化合物极性大小。 A B C;一、天然产物化学成分的预试验与提取;优点：取之不尽、用之不竭；价廉易得；使用安全。 缺点：提取液中杂质较多（如无机盐、蛋白质、糖类和淀粉等）；水提液易变质、发霉、不易保存；沸点高，蒸发浓缩时间长；沸水提取时，淀粉被糊化，增加过滤难度；皂苷及粘液质，减压浓缩时，产生大量气泡等。;一、天然产物化学成分的预试验与提取;一、天然产物化学成分的预试验与提取;;;;3 渗漉法;4 回流提取法;;;;一、天然产物化学成分的预试验与提取;;;α -山道年;;;;;;;透析膜有动物性膜（猪、牛的膀胱） 、火棉胶膜、羊皮纸膜、蛋白胶膜、玻璃纸膜等 多用市售的玻璃纸或动物性半透膜扎成袋状，外面用尼龙网袋加以保护，小心加入欲透析的样品溶液，悬挂在清水容器中。经常更换清水使透析膜内外溶液的浓度差加大，必要时适当加热，并加以搅拌，以利透析速度加快。 ;;;;;;;结晶纯度的判断;一般单体纯化合物结晶的熔程较窄，在0.5~1℃左右，如果熔程较长则表示化合物不纯。 例外：一些立体异构体和结构非常类似的混合物，熔点一致，熔程较窄，但不是单体；双熔点，如防己诺林碱在176℃时熔化，至200℃时又固化，再在242℃时分解。 ;;;;液-液萃取法（两相溶剂）萃取法;萃取操作中的注意事项：?　　1）破坏乳化方法：较长时间放置；加入少量电解质，如氯化钠。　　2）溶剂与水溶液应保持一定量的比例，第一次萃取时，溶剂要多一些，一般为水提取液的1/3，以后的用量可以少一些，一般为1/4-1/5。?　　3）一般萃取3～4次即可。但亲水性较大的成分不易转入有机溶剂层时，须增加萃取次数，或改变萃取溶剂。　　;;;;;;;;;;;溶剂（展开剂或洗脱剂） ;;溶质（被分离成分）;极性大小顺序：烷烃卤代烷醚酯酮醛酰胺胺 醇水酚羧酸;小结 ;;吸附色谱常见的操作方式是吸附薄层色谱（TLC）和吸附柱色谱。薄层色谱主要用于化学成分的分离、鉴定及探索柱色谱分离的条件，柱色谱主要用于化学成分的分离制备。 ;薄层色谱（TLC）;（1）吸附薄层色谱法 ;三要素：吸附剂、被分离成分、展开剂 化合物在吸附薄层上移动的速度与展开剂、被分离成分的极性有关。 展开剂的极性越大，化合物的移动速度越快；被分离成分的极性越大，移动速度越慢。 ;;;;;;; 将计算出的Rf值与已知化合物的Rf值对照，也可与文献上记载的Rf值比较，进行定性鉴别。 ;;;;装柱：湿法、干法 加样：上样，分干法和湿法 湿法：将样品溶于极性尽可能小的溶剂中 干法：将样品溶于易溶溶剂，再与吸