第1章天然药物化学技巧.pptVIP

第一章 总 论;*;;;;第一章 总 论;*;*;*; 第一节 绪 论;曲克芦丁： 3，47-三[0-(2-羟乙基)-5羟基黄酮-3]-芸香苷;*;*;*;*;*;*;*;*;*;3)分离纯化法 ①根据物质溶解度的不同进行分离 1)温度不同,溶解度不同（结晶、重结晶） 原理: 一个固体成分达到一定纯度，在某种条件下就会有结晶析出。 溶剂的选择：对所需成分加热时溶解度大，遇冷时溶解度小；而杂质冷 热均不溶或均溶于该溶剂。 ;2)改变溶液的极性去杂 a.通过加入另一种溶剂以改变溶剂的极性，使一部分物质沉淀析出，从而实现分离。如：水提醇沉法 水/醇法：除去糖类，蛋白质等水溶性杂质。 醇/水法：除去树脂，叶绿素等水不溶性杂质。 醇/醚法和醇/丙酮法：可使皂苷成分沉淀析出，而脂溶性的树脂等类杂 质则留在母液中 3)酸碱法（生物碱酸提碱沉淀，黄酮碱提酸沉淀） b.酸性、碱性或两性化合物，通过加入酸或碱来调节溶剂的pH值，改变分子的存在状态（游离型或离解型），从而改变溶解度而实现分离出，而脂溶性的树脂等类杂质则留在母液中。 ;4)沉淀法 酸性或碱性化合物通过加入某种沉淀试剂使之生成水不溶性的盐类等 沉淀析出而实现分离。如生物碱加入有机酸可生成不溶于水的有机酸 盐沉淀，酸性化合物可加入钙盐、铅盐、钡盐等生成不溶性的沉淀。 酸性：铅盐（醋酸铅）、钙盐、钡盐。 碱性：苦味酸盐、苦酮酸盐、磷钼酸盐、雷氏盐等 ;*; ;3.分配比与pH：溶剂系统pH的变化影响酸性、碱性、及两性有机化合物的存在状态（游离型或离解型），从而影响在溶剂系统中的分配比。 ;*;方法： 1）简单萃取法：仪器，实验室用分液漏斗或下口瓶。一般在水和亲脂性有机溶剂中进行，根据情况，也可用酸水或碱水。天然药物中成分比较复杂，一般一次萃取分离不出来纯品，需要再配合其他方法。 由于成分的复杂性及相互作用，萃取中易发生乳化。破坏乳化的方法有：（1）加热敷；（2）将乳化层抽滤；（3）长时间放置（24小时以上）。 ;*; ;3） 连续萃取法：采用连续萃取器萃取。利用两溶液比重不同自然分层和 分散相液滴穿过连续相溶剂时发生传质。此法可克服用分液漏斗多次萃取 操作的麻烦。 ;4）液滴逆流分配法（DCCC法）：是利用流动相形成液滴，通过作为固定 相的液柱而达到分离纯化的目的。 ;*;*;*;*;*;吸附柱色谱法的应用 成分的浓缩与精制： 活性炭脱色： 除去脂溶性色素 从大量稀水溶液中浓缩微量成分：活性炭分离一叶萩碱 成分的分离：实际工作应用最多。 薄层色谱法（Thin Layer Chromatography,TLC) 柱色谱法（Column Chromatography,CC);薄层色谱法: 用途：摸索柱色谱色谱的分离条件 鉴定化合物的纯度 混合物的分离 原理：;基本操作： 薄层板的制备 点样 展开 显色：UV灯下观察；显色剂显色 计算Rf值;注意： Rf值是化合物的一种物理常数，即在 特定的色谱条件下，同一化合物应具有同Rf值。 影响Rf值的主要因素： 展开剂 化合物结构 吸附剂 ;柱色谱法： 硅胶、氧化铝柱色谱应注意的问题： 吸附剂的用量一般为试样量的30-60倍（特殊可达100-200倍），色谱柱的径/高比为（1:15-1:20） 装柱：干法装柱、湿法装柱（极性小的溶剂） 上样：干法上样、湿法上样（极性小的溶剂） ;洗脱剂的极性增加：梯度洗脱 常用溶剂系统： 石油醚－丙酮、石油醚－乙酸乙酯、氯仿－甲醇 避免发生化??吸附：合理选用吸附剂及洗脱剂 可以利用TLC来选择柱色谱的色谱系统： Rf:0.2-0.3 ;*;② 成键位置对吸附力影响:易形成分子内氢键，吸附减小, Rf 值增大。 ;*;④ 苷元相同时，Rf值：三糖苷二糖苷糖苷苷元 ;聚酰胺色谱的应用： 应用范围：黄酮类、酚类、蒽醌类的分离，也可用于生物 碱、萜类、甾体、糖类、氨基酸、蛋白质的分离。但对鞣质 的吸附特强，近乎不可逆，常用于在提取物中脱去鞣质。 溶剂系统：含水溶剂系统：各种苷类、糖类、有机酸等水溶 性成分的分离，及黄酮苷、苷元的分离。 非极性溶液系统：萜类、甾体、黄酮苷元、酚类、醌类等极 较弱成分的分离。 常用溶剂系统：甲醇－水、乙醇－水、丙酮－水、NaOH溶液 ;例：用聚酰胺进行TLC,MeOH-H2O为洗脱剂，试比较下列化合 物的Rf 。 ;④根据物质分子的大小进行分离 如葡萄糖凝胶(Sephadex G and LH-20...） ⑤根据物质解离程度不同的分离法 离子交换法： 强酸： -SO3H 强碱： -N+(