蛋白质的合成与加工ProteinSynthesisandProcessing解答.ppt

(3) 二硫键异构酶催化链内或链间二硫键形成 多肽链内或肽链之间二硫键的正确形成对稳定分泌蛋白、膜蛋白等的天然构象十分重要，这一过程主要在细胞内质网进行。 二硫键异构酶在内质网腔活性很高，可加速形成正确配对的二硫键 ，从而促进蛋白质折叠的全过程。 (4) 脯氨酰顺-反异构酶催化顺反异构加速折叠 多肽链中肽酰-脯氨酸间形成的肽键有顺反两种异构体，空间构象差别明显。 脯氨酰顺-反异构酶可促进上述顺反两种异构体之间的转换。 脯氨酰顺-反异构酶催化这种异构化的过程，可加速蛋白质的折叠。 2．目前对大肠杆菌的蛋白质折叠过程了解较多 (1) 折叠过程首先经历Hsp70反应循环 Hsp40结合未折叠蛋白 Hsp70-ATP复合物 Hsp70-ADP-未折叠蛋白复合物 Grp E ADP释放 ATP结合Hsp70，释出完成部分折叠的蛋白质 Hsp40- Hsp70-ATP-未折叠蛋白复合物 ATP ADP (2) 部分折叠的 蛋白质尚需经历 GroE-GroES 反应循环 三、亚单位聚合形成多亚基蛋白质 由一条以上肽链构成的蛋白质和带有辅基的结合蛋白质，肽链之间或多肽链与辅基之间需要聚合，方可成为活性蛋白质。 四、蛋白质的靶向输送 新合成的蛋白质/多肽链须经分选、靶向输送到细胞特异区间或亚细胞器，在那里进行翻译后加工或发挥作用。 大肠杆菌新合成的多肽，一些仍停留在胞浆之中，一部分则被送到质膜、外膜或质膜与外膜之间的空隙。有的也可分泌到胞外。 ※ ※ （二） 成肽 成肽是在转肽酶 (peptidase)的催化下，核蛋白体P位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的?-氨基结合形成肽键的过程。 P位氨基酰基/肽酰基与A位氨基酰-tRNA氨基形成肽键（即成肽） 成肽的反应过程 （三） 转位 在转位酶的催化下，在延长因子EF-G和GTP参与下， 促进核蛋白体向mRNA的3?-端移动一个密码子的距离， 使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、 而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。 在原核生物，转位依赖延长因子EF-G； 在真核生物，则依赖GTP和EF-G的相应蛋白质：EF-2。 EF-G有转位酶 (translocase)活性，可结合并水解1分子GTP，释放的能量促进核蛋白体向mRNA的3? 侧移动，使起始二肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核蛋白体P位，而卸载的tRNA则移入E位。 转位需要延长因子EF-G参与。 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 成肽 → 转位 → 下一轮进位 肽键的形成 进位 转位 肽链合成延长过程 成肽 原核生物的翻译-延长 （四）核糖体在肽链延长阶段有校读作用 核糖体的校读功能建立在正确的密码子与反密码子相互作用的基础上。 四、肽链合成终止阶段释放新生的肽链 肽链合成的终止包括终止密码的识别，肽链从肽酰-tRNA中释出，从核糖体分离出mRNA和大、小亚基拆开。 指核蛋白体A位出现mRNA的终止密码子后， 多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体大、小亚基等分离的过程。 终止过程需要的蛋白因子称为释放因子 (release factor, RF) 1．识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG； 而RF-2可识别UAA、UGA。 2．诱导转肽酶转变为酯酶活性，帮助完成合成的 多肽从P位点的tRNA释放。 释放因子的功能： 原核生物释放因子：RF-1、RF-2、RF-3 真核生物释放因子：eRF ※ ※ 原核生物的翻译-终止 原核肽链合成终止过程 U A G 5 3 RF COO- 多聚核蛋白体(polysome) mRNA与多个核糖体的聚合物。 使蛋白质合成以高速度、高效率进行。 电镜下的多聚核蛋白体 原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别 释放因子为eRF 释放因子为RF-1、RF-2和RF-3 终止阶段 延长因子为eEF-1 ?、eEF-1 ? ? 和eEF-2 延长因子为EF-Tu、EF-Ts和EF-G 延长阶段 有至少10种eIF参与起始复合物的形成 有3种IF参与起始复合物的形成 mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合 mRNA中的S-D序列与16S rRNA 3?-端的一段序列结合 核蛋白体小亚基先与Met-tRNAiMet结合，再与mRNA结合 核蛋白体小亚基先与mRNA结合，再与fMet-tRNAfMet结合 起始氨基酰-tRNA为Met-tRNAiMet 起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNAfMet 起始阶段 40S小亚基