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字号：大 中 小 第一节结缔组织和肌纤维染色 Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法) 用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。 原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被苦味酸染成黄色。此方法是一种优良的传统方法。 固定：10%福尔马林 切片：4-6微米 试剂： Weigert铁苏木精液： A液：苏木精1g，无水酒精100 ml。一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用。 B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml。 两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用。24h后失去染色能力。 Van Gieson液： 1%酸性复红水溶液??? 10 ml 苦味酸饱和水溶液??? 90 ml 临用时1:9混合过虑后使用。 ? Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤： 1．? 石蜡切片脱蜡至水。 2．? Weigert苏木精液5-10 min。 3．? 充分水洗。 4．? Van Gieson液1-5 min。 5．? 95%酒精迅速分化数秒。 6．? 无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。 结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。 体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3～6个月。 ? 二 Masson三色法 试剂： Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。 将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。 Masson丽春红酸性复红液： 丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。 0.2%冰醋酸水溶液： 冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。 1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。 苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。 1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml。 Masson三色法步骤 1．? 石蜡切片脱蜡至水。 2．? 铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。 3．? 依次自来水和蒸馏水洗。 4．? 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。 5．? 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。 6．? 蒸馏水洗。 7．? 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。 8．? 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。 9．? 1%磷钼酸水溶液分化3-5min。 10．????????????? 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。 11．????????????? 以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。 12．????????????? 95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。 结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色)，胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。 体会与说明： 1．控制好染色步骤。 2．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。 3．0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。 4．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。 ? 弹力纤维染色 Schmorl染色法 石炭酸-品红液：碱性品红2g，无水酒精50ml，熔化石炭酸25ml，在37温箱过夜，冷后过滤。 Weigert间苯二酚-品红液：碱性品红1g，间苯二酚（Resorcin）晶体2g，蒸馏水100ml。 ?????? 在锥形烧瓶内煮沸，加29%三氯化铁水溶液12.5ml搅拌并继续煮沸2-5mine。冷后过滤，烘干滤纸及沉淀，放入烧瓶并加95%酒精100ml在水浴加温至染料全溶解，待冷却后过滤，并补足因加热蒸发的酒精至100ml。最后加浓盐酸2ml摇匀备用。 弹力纤维Schmorl染色法步骤 1．? 石蜡切片脱蜡至水。 2．? 石炭酸-品红液37染1h，或室温24h。 3．? 70%酒精漂洗。 4．? Weigert间苯二酚-品红液染色20-30min。 5．? 无水酒精分色约1/2h，如染色过度也可改用0.5%盐酸的95%酒精分色。 6．? 流水冲洗后换蒸馏水漂洗。 7．? 常规苏木精染核5-10min。 8．? 水洗。 9．? Van Gieson液复染3-5min。 10．????????????? 蒸馏水洗。 11．????????????? 酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 结果：弹力纤维蓝黑色，胶原纤维红色，肌纤维黄色，细胞核蓝色 ? 弹力和胶原纤维染色法 试剂： 维多利亚蓝染色液：维多利亚蓝（Victoria blue 上海）2.0g，糊精??? 0.5g，间苯二酚4.0g，蒸馏水??? 200ml。 混合后加热煮