生物化学-第十章RNA的生物合成资料.pptVIP

TATA框是RNA聚合酶Ⅱ和转录因子形成前起始复合物的主要装配点。 起始子（initiator，Inr）：转录起点 TATA Py PyANTAPyPy +1 Inr 2.转录因子（ transcription factor ，TF）： RNA聚合酶在启动子部位起始转录需要的辅助因子（蛋白质）。 真核生物的转录，启动子由转录因子而不是RNA聚合酶识别。 参与RNA聚合酶Ⅱ转录起始的转录因子数目众多，分为三类：通用转录因子（general transcription factor，GTF）、上游因子、可诱导因子。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ P564 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC（前起始复合物）的组装 Pol-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 P564 原核生物与真核生物转录的区别 原核生物 真核生物 RNA pol 一种 高度分工 起始转录因子 没有 需要（各不同） 启动子以外序列 没有 有且复杂 转录产物 多顺反子 单顺反子 场 所 转录与翻译偶联 不偶联 转录终止 两种终止子 不明确 DNA复制 转录 原料 dDNA NTP 模板 完整两条链双向复制 DNA区段一条链不对称转录 引物 RNA为引物 不需要 酶与蛋白因子 9种酶和蛋白因子 全酶 校正功能 有 无（很有限） 差错率 10-9-10-10 10-4-10-5 原核生物复制与转录比较 第二节 转录后加工 基因转录的直接产物是初级转录物，一般是无功能的，往往需经过结构和化学的变化（转录后加工）才会具有功能。 转录后加工的方式有多种，但本质相同：是增减核苷酸或核苷酸的修饰。 三种主要的RNA在原核和真核生物中的加工方式不完全相同。 几个基本要点： 即使同一RNA前体也可能有不同加工方式，产生几种产物，这是基因表达调控的一种手段。 P570 ⑴ 真核细胞每种转录产物都是各种RNA的前身，必须在胞核内经过适当加工，使之变成具有活性的成熟RNA后，由胞核运至胞质才能执行翻译功能。 ⑵原核细胞mRNA不需加工，tRNA和rRNA需要加工。 ⑶mRNA前体加工复杂。真核细胞转录作用和翻译作用无论在空间上还是时间上都是彼此分开进行的。 真核细胞与原核细胞转录产物后加工的比较： 相同点： 二者tRNA和rRNA加工相似 不同点： 一、原核生物RNA的转录后加工 （一）原核生物mRNA前体加工 原核生物mRNA一般不稳定，很少经历加工，多数是边转录、边翻译。 唯一的加工作用是多顺反子mRNA在RNaseⅢ的催化下，裂解为单独的顺反子。 （二）原核生物tRNA前体的加工 原核生物tRNA初始转录本有三种 P570 原核生物基因表达调控的单位是操纵子，其转录物为多顺反子。 （1）多数为多顺反子 （3）由tRNA和rRNA串联组成 （2）少数为单顺反子 5’成熟酶 多顺反子tRNA两个末端的加工 识别加工部位的空间结构。由蛋白质和RNA组成（核酶）。 F F P572 P572 3’成熟酶 tRNA 核苷酰转移酶 （1）RNaseP 切除E.coli前体tRNA5′的前导序列（41nt）。 （2）去尾，形成3’-OH末端。由内切酶和外切酶（RNaseF和RNaseD）共同参与。 （3）修饰。主要是碱基修饰，方式近百种，常见的如通过甲基化酶，硫醇酶，假尿嘧啶核苷化酶等的作用进行修饰成为特殊的碱基 （4）加上CCA 剪切 修剪 核苷酸修饰 原核生物tRNA前体的加工 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 原核生物 rRNA以多顺反子的形式存在，还可能带有某些tRNA的基因。 E.coli中rRNA有7个转录单位,每个转录单位含有16S、23S、5S rRNA 及一个或几个tR