乳腺癌放射治疗的临床和实验研究介绍.ppt

乳腺癌放射治疗的临床和实验研究 放射治疗在乳腺癌治疗中的作用 保乳手术后 根治术后 晚期及复发乳腺癌 存在的问题 疗程长达5－6周 化疗与放疗的衔接问题 剂量分割研究的意义　 减少照射的次数，缩短疗程，方便患者 优化资源利用 优化放疗与化疗安排 乳腺癌放射治疗的特点　 术后亚临床灶，肿瘤负荷低 乳腺癌细胞的α/β值可能较低 乳腺癌的Tpot较长，约14天 1987年1月至1993年1月 术后放疗三种剂量分割方案 3个剂量分割方案组的临床特点(1) 3个剂量分割方案组的临床特点（2） 3个剂量分割方案组的放疗部位 结果 局部区域复发率（照射野内） Cox多因素回归分析 照射野内复发的相关因素 腋窝淋巴结转移个数有显著意义 （P＝ 0.0008） 年龄、剂量分割方法、病理类型、 有无化疗均无显著意义 5年无瘤生存率 正常组织放射反应 3个剂量分割方案的等效生物剂量(BED) 讨论 300 cGy/次组的特点 隔日照射 总的治疗时间未缩短 每周治疗次数减少 对患者和设备资源来说都有利 快速照射法的特点 快速照射组的总剂量较低。 缩短了疗程时间，为高危患者尽早开始化疗赢得了时间。 照射的次数比常规大大减少，减少了住院时间或门诊放疗的往返不便。 结 论 　300 cGy/次、隔日照射的方法 与常规分割疗效相似 研究目的 应用动物模型比较亚临床 灶放射治疗的剂量分割方案 近交系BALB/C雌性小鼠 小鼠乳腺癌EMT－6细胞株 肿瘤体外的倍增时间12小时 实验设计 肿瘤细胞接种 肿瘤亚临床灶生长的病理观察 实验分组, 不同方案照射 观察肿瘤形成率 、肿瘤控制率 照射的剂量分割方案 结果 1. 亚临床灶病理观察 （1） 1. 亚临床灶病理观察（2） 1. 亚临床灶病理观察（3） 3.不同剂量分割方案的肿瘤形成率 各组肿瘤形成率两两比较的P值 3.不同剂量分割方案的肿瘤控制率 各组肿瘤控制率两两比较的P值 讨论 小鼠亚临床肿瘤照射的特点 对照组可以100%形成肿瘤 几乎不存在乏氧问题 肿瘤形成率和控制率作为终点指标 可靠、易于评价 临床和实验动物快速照射的差距的原因分析 小鼠肿瘤细胞增殖明显较快 疗程中休息一周，肿瘤加速再群体化 结 论 对于细胞倍增快的肿瘤而言 加速超分割的疗效最好 下一步的研究　 多种肿瘤模型验证 正常组织损伤的验证 　 裸小鼠移植瘤 模型验证 探讨放射增敏的必要性 现代放射治疗技术提高疗效有限 肿瘤的分子靶向研究进展迅速 分子靶向药物 Flavopiridol 新合成的黄酮类生物碱 cdk1 (cdc2)、cdk2、cdk4、cdk7的强力抑制物 诱导G1期的阻滞 诱导凋亡 下调c-erbB2的表达 分子靶向药物 Flavopiridol 对上皮细胞系（前列腺、食管、肺、头颈部癌 有细胞毒作用。 已进行 I-II 期临床试验 实验路线 药物对于细胞生长的影响 克隆形成实验：观察放射增敏效应 观察对细胞周期的影响 彗星法测定DNA的初始损伤及修复 Western blot：相关蛋白的表达变化 实验材料 肿瘤细胞：973肺腺癌细胞系 Flavopiridol：用DMSO配成10mM原液 照射条件：6 MV X线 实验1.　对细胞生长的影响 75cm2培养瓶 每瓶细胞接种细胞数3×105个 贴壁后加入不同浓度的Flavopiridol 每天取各浓度的培养瓶，细胞消化，计数 共计数5天 实验2.　放射增敏效应的研究  在培养瓶中接种细胞 24小时后加入Flavopiridol 照射剂量0、1、2、3、5、7和10Gy 实验分组：对照组、单纯药物、单纯照射、照射＋药物，Flavopiridol浓度均为100 nM。 14天后计数各组的克隆形成 绘制细胞存活曲线 Flavopiridol对放射敏感性的影响 实验3. 对细胞周期的影响 实验分组： 　1. 单纯照射 　2. 单纯药物 　3. 照射加药物 照射后12小时收集细胞 流式细胞仪检测 实验4.　慧星法检测DNA损伤 实验5.　相关蛋白测定 实验分组： 　1. 单纯照射 4Gy 　2. 单纯药物 200nM 　3. 照射加药物 4. 对照 实验5.　相关蛋白测定 照射后12小时提取总蛋白 Western blot测定: 　 Tyr 15 cdc2 c-erbB2 βactin作为内对照 结 论 　Flavopiridol具有放射增敏作用 对照组 单纯照射 Flavo加照射 图示：慧星法检测的结果 Flavo对于照