AnnexinA3siRNA对胃癌细胞增殖与侵袭能力影响的研究.pdf

结论…………………………………………………………………………………………………97 综述膜联蛋白A3在中的作用进展……………………………………．．98 致谢………………………………………………………………………………………………．115 个人简历…………………………………………………………………一116 中文摘要 Annexin A3．siRNA对胃癌细胞增殖及侵袭能力影响的研究 摘 要 胃癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，在所有肿瘤中，发病率居 世界第四位，死亡率为世界第二位。尽管全球范围内胃癌发病率有所下降， 但是在亚洲国家其发病率仍然较高。尽管治疗策略在不断改进，比如，化 疗已经作为辅助治疗手段应用于提高治疗手术切除率或用于延长不可切 除胃癌患者的生存率。但其预后仍然不理想，5年生存率不到30％。现在 认为，遗传、生活习惯、幽门螺杆菌感染等都会导致胃癌的发生。多种关 键分子或信号通路的改变可能通过影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭促进 胃癌的发生发展。 一类结构相关钙依赖的磷脂结合蛋白超家族，一种细胞溶质蛋白，广泛存 在于各种组织细胞中，且含量较高，约占细胞总蛋白质的2％以上。 Annexins以可溶形式和以通过与细胞骨架组成蛋白或调控细胞与细胞外 基质相互作用蛋白的稳定结合或可逆结合的形式存在。目前可以分为A、 B、C、D、E 5组。A组主要存在于高等脊椎动物中，人类的组织器官 中目前已有13个成员，其中就包括annexin A3。脊椎(哺乳)动物的膜联蛋 白属于A类．自上世纪70年代末发现第一个膜联蛋白至今，在脊椎(哺乳) 类生物中已发现了12个家族成员。它们在结构上具有相似性，其高度保守 的C末端，由70～80个氨基酸构成4个重复序列；同时，N端氨基酸的长度 及序列各不相同，与其各异的功能相关。B组主要存在于无脊椎动物中：C 组主要存在于真菌和部分单细胞真核生物中：D组主要存在于植物中，E组 主要存在于原核生物中。该家族成员在结构上高度相似，都具有(1)C． 末端的保守结构，由4个同源重复序列组成，每个由70个氨基酸残基组成 的重复序列，为高度0t螺旋结构；称为中心结构域(coredomain)，可通过以 钙离子依赖的方式可逆地和细胞膜磷脂结合；各种annexins蛋白的中心结 (2)特异可变的N端结构域， 构域大约有(40‰60％)的氨基酸序列同源； 由20～200个氨基酸残基组成，不同的膜联蛋白中N端序列及长度各不 相同，主要发挥调节膜联蛋白与配体的相互作用和与膜结合的作用，N末 中文摘要 端变化是决定每种蛋白的不同的生物学功能而且每种annexins蛋白在机体 A3， 的不同组织和部位也执行着不同的生物学功能。膜联蛋白A3(annexin ANXA3)，是在此家族中既往研究比较少的一个蛋白。在细胞分化和细胞 迁移以及免疫调节、骨形成、钙化等多方面中均有一定作用。家族成员膜 联蛋EtA3(AnnexinA3)在肿瘤的发展、转移和耐药形成过程中都扮演重要 角色。近几年来ANXA3在肿瘤相关研究方面逐渐成为热点，已经有证据 表明。它在肿瘤依赖的自身免疫调节方面有一定特殊作用，而且越来越多 种类的肿瘤研究表明，它可能会是一个很好的耐药相关或肿瘤预后提示的 标记物。然而，ArmexinA3在不同肿瘤具有不同的作用，可能是肿瘤抑制 因子，也可能是肿瘤促进因子，这依赖于肿瘤细胞和组织中的类型。因此， 楚。 水平的改变和活性改变以及定位的改变可以导致人类多种疾病的发生，并 可导致膜联蛋白病。Annexins作为一类钙依赖性磷脂结合蛋白，在细胞信 号转导过程中有很重要作用，目前对其性质结构等方面有了一些了解，但 并不全面，在以后的研究中有待进一步研究拓展，特别是在细胞增殖和凋 亡，肿瘤的发生、浸润和侵袭等过程中的生物学作用机制。 因此，本研究以临床切除的胃癌组织及体外培养的胃癌细胞系为研究 对象，通过实时定量RT-PCR、免疫印迹等方法观察Annexin