HPLC测定板蓝根腺苷含量.doc

2014届本科生毕业设计（论文） 题目：HPLC法测定板蓝根药材中腺苷含量 2010级药学(9)班 学 号 完成人姓名 冯学武 指导教师姓名 张文芝 2014年4月23日 HPLC法测定板蓝根药材中腺苷含量 目的：建立一种高效液相色谱法（HPLC）测定板蓝根药材中腺苷的含量。方法：用60%甲醇超声提取板蓝根药材，HPLC检测，Lichrospher C18柱（4.6mm×250mm5m）为色谱柱，甲醇-水（10:90）为流动相；检测波长为260nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。结果：腺苷在0.198-0.66μg范围内呈现出良好的线性关系r=0.9993(n=5)；平均回收率为99.68%，RSD%=1.03%。结论：该方法简便快速，测定结果准确可靠，可用于板蓝根药材的质量控制标准 [关键词] 腺苷；板蓝根；高效液相色谱法 Determination of Adenosine Content in Banlangen by HPLC Method ABSTRACT OBJECTIVE: To develop a method for adenosine content in banlangen herbs by HPLC METHOD: Extracted with 60% methanol content ultrasound banlangen by high performance liquid chromatography, .Eluted with methyl:water(10:90) in a flow rate 1.0ml/min,adenosine was analyzed under the wavelength of 260nm in ODS C18 column, temperature was 30℃.RESULTS: Adenosine in the range of 0.198-0.66μg showed a good linear relationship, r = 0.9993 (n = 5); average recovery was 99.86%, RSD% = 1.03%. CONCLUSION: The method is simple, rapid, accurate and reliable measurement results can be used for quality control of banlangen Key words: Banlangen HPLC method Adenosine 目录 英文摘要1 引言 板蓝根为十字花科菘蓝属植物菘蓝Isatisindigotica Fort.的干燥根,《中国药典》1985一2010年版一直有收载,具有性寒味苦,有清热解毒、凉血消肿的功效,临床应用广泛。而《中国药典》未规定其质量控制的含量测定方法和指标。腺苷是板蓝根所含的一种天然成分,具有抗凝血、抗扩张冠状动脉、松弛支气管平滑肌、镇静中枢神经和抗心率不齐的作用[1]，板蓝根药材是公认的具有抗病毒的有效中药，在临床中广泛使用。尽管对它们已作了很多研究，但其有效成分及其作用机理尚未有确切的结论，几十年来板蓝根药材及其制剂的质量监控一直未能解决[2.3]。文献报道中有人主张它们的质量控制指标应选靛蓝、靛玉红。但也有人认为“抗内毒素试验表明:靛蓝和靛玉红不具有抗内毒素活性。”[4]而它们的水溶性成分却具有很强的抗病毒、抗菌、抗内毒素、增强机体免疫作用。口前含板蓝根制剂多采用水作为提取溶剂，而靛蓝和靛玉红具有很强的脂溶性，有人对水提取液的靛蓝、靛玉红作了含量测定，结果发现其提取率仅为1.5% -3.5%。此外，浓缩过程的损失率高达92 4%;在通过提取、浓缩、醇沉、收膏等操作后，其转移率仅为3.3%-13%[5.6] 。 文献报道，板蓝根药材的水溶性成分腺苷，具有抗炎作用[6.7]，与板蓝根药材功能主治一致。但目前尚未有板蓝根腺苷含量测定的相关报道。腺苷的含量测定方法有薄层扫描法、薄层一紫外法、紫外分光度法及高效液相色谱法等。高效液相色谱法具有简便、快速、灵敏、重现性好等特点。通过试验，建立了腺苷含量测定的高效液相色谱法，为板蓝根药材及其制剂的质量控制提供了较为实用的检测方法。 1化学成分 到目前为止，己经从板蓝根中分离出近百个化合物，据文献报道主要有以下十一大类。即生物碱类、有机酸类、黄酮类、木脂素类、蒽醌类、甾醇类、芥子类苷、含硫类、氨基酸类、核苷