实验四 静脉采血、血涂片的制备与染色.pptVIP

 实验四 静脉采血、血涂片制备与染色 操作 准备试管 仔细阅读受检者申请单，决定采血量，准备每个试验所需的试管，并应按一定顺序排列，如患者仅作凝血试验一项，最初1ml血液必须丢弃。如做血细胞沉降率测定，需取试管1支，加入适当抗凝剂（109mmol/L枸橼酸钠0.4ml）。 检查注射器 打开一次性注射器包装，左手持针头下座，右手持针筒，将针头和针筒紧密连接，并使针头斜面对准针筒刻度，抽拉针栓检查有无阻塞和漏气。最后排尽注射器中的空气，备用。使用前，保持针头无菌状态。 操作前准备 操作前准备 操作前准备 扎压脉带 在采血部位上端约6cm处，将压脉带绕手臂一圈打一活结，压脉带末端向上。要求患者紧握和放松拳头几次，使静脉隆起。压脉带应能减缓远端静脉血液回流，但又不能紧到压迫动脉血流。 选择进针部位 采用左食指，触摸进针部位的静脉。 操作中 静脉采血的常用部位 贵要静脉 正中静脉 头静脉  消毒皮肤 用30g/L碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外，顺时针方向消毒皮肤，待碘酊挥发后，再用75%乙醇棉签以同样的方式拭去碘酊，待干。 穿刺皮肤 取下针头无菌冒，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手持注射器，食指固定针头下座。保持针头斜面和针筒刻度向上，沿静脉走向使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤，然后成5°角向前穿破静脉壁进入静脉腔。确认穿刺入静脉中心位置，并沿着静脉走向将针头推入10~15mm。 操作中 抽血 用左手缓缓向后拉注射器针栓，见少量回血后，松开压脉带。然后，向后拉针栓到达采血量刻度。若使用一次性真空采血装置，当针头进入血管后会见少量回血，将真空采血管插入试管托内采血针中，因试管内负压作用，血液自动流入试管，到达采血量刻度后拔出试管即可。 止血 嘱受检者松拳，用消毒棉签压住进针部位，迅速向后拔出针头。继续紧按住消毒棉签3min。 放血 从注射器上取下针头。将血液沿试管壁缓缓注入，到达标记处。含抗凝剂试管需迅速轻轻颠倒混匀几次。 操作中 注意事项 1、采血前准备 采血前应向患者耐心解释，以消除不必要的凝虑和恐惧心理。如遇个别患者进针时或采血后发生眩晕，应立即拔出针头让其平卧休息片刻，即可恢复。必要时可给患者嗅吸芳香酊、针刺（或拇指按掐）人中和合谷等穴位。若因低血糖诱发眩晕，可立即静注葡萄糖或嘱患者服糖水即可。如有其它情况，应立即找医师共同处理。 选择静脉 如果肥胖患者的静脉暴露不明显，可以左手示指经碘酊、乙醇消毒后，在采血部位触摸，发现静脉走向后凭手感方向与深度试探性穿刺。 检查注射器 静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固，针筒内是否有空气和水分。所用针头应锐利、光滑、通气，针筒不漏气。抽血时针栓只能向外抽，不能向静脉内推，以免形成空气栓塞，造成严重后果。 扎压脉带 采静脉血时止血带压迫时间不能过长、绑扎不能过紧，以避免淤血和血液浓缩，最好不超过1min，否则会影响某些试验结果，如造成血红蛋白和血细胞比容增高。 穿刺皮肤 不能从静脉侧面进针。针头进入静脉的感觉是：皮肤有一定阻力，而静脉壁阻力较小，更富有弹性。 抽血 血液加入抗凝试管中应与抗凝剂充分混匀达到抗凝目的；无需抗凝时则将血液直接注入试管中。要防止血液标本溶血，因为溶血后标本不仅红细胞和血细胞比容减低，还会使血清（浆）化学成分发生变化。造成溶血的原因有：注射器和容器不干燥、不清洁；压脉带捆扎时间太久，淤血时间长；穿刺过程中损伤组织过多；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或用力推出时产生大量气泡；抗凝血用力振荡；离心时速度过快等。 二、血涂片制备 目的：掌握普通手工制备血涂片的方法。 实验用品： 1、器材：一次性采血针、消毒棉签、推波片、载玻片等。 2、试剂：75%乙醇、30g/L碘酊。 标本：EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。 取血待酒精干后，刺破皮肤，使血自然流出，勿挤。取干净载片，让血滴在离载片一端中4～5毫米处，注意手指 持握载片的边缘，勿触及其表面。不能使载片接触取血部位的皮肤。 取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。 标准血涂片：标准的血涂片为舌形，边缘整齐，厚薄适宜，头体尾分明的血膜片，长约4cm,两端和两侧留有空隙（1.5cm和0.3cm) 三、血涂片的染色 染色原理：　 (1)瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。 (2)细胞的染