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实验四 染色体的核型分析 2. 学习和掌握利用有丝分裂中期染色体进行核型分 析的基本方法 一、实验目的 了解染色体核型分析的原理及各项参数意义 二、实验原理 染色体组：一个二倍体生物中配子所含有的全套染色体。 染色体核型：又称染色体组型，指染色体组在细胞分裂中期所有可测定的表型特征总称，包括染色体的总数、染色体组的数目、组内染色体的基数及每条染色体的大小和形态。 染色体核型分析：是对染色体进行分组、对核型的各种特征进行定量和定性描述，是研究染色体的基本手段之一，可以用来鉴别真假杂种，对染色体结构变异数目变异、B染色体、物种的起源和植物的遗传进化、基因定位等方面研究也具有重要的参考价值。 核型模式图：将染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短，形态等特征排列起来的图像。 大蒜中期染色体及核型 蚕豆核型模式图（示例） 大蒜(Aillum sativum, 2n=2x=16)细胞有丝分裂中期染色体玻片标本和显微摄影所得的照片。要求照片上染色体分散良好，无重叠或重叠很少，着丝粒和随体等形态清晰可辨，染色体不断裂。 三、实验材料 镊子、剪刀、毫米尺、牙签、浆糊 四、实验器具、试剂 五、实验步骤 1、染色体组型分析指标： （1）染色体数目：至少统计5-10个个体，30个以上细胞的染色体数目，显微镜下选出10个中期分裂相的细胞，进行显微照相。 （2）绝对长度：毫米尺直接测量的实际长度（μm）,或经显微摄影后在放大照片上的换算长度。 绝对长度（μm）=（放大的染色体长度（mm）/放大倍数）×1000 （3）相对长度：指单个染色体的长度占单套染色体组（性染色体除外）总长度的百分数。 相对长度（%）=（单个染色体长度/单套染色体组全长）×100% （4）臂比值：臂比是反映着丝点在染色体上的位置。 臂比值=长臂/短臂（精确到0.01） （5）着丝点位置：根据臂比值将染色体分为以下几种类型 臂比 染色体类型 1.00 正中部着丝点（Media point） M 1.01～1.70 中部着丝点区(media region) m l.71～3.00 近中部着丝点区(submedia region) sm 3.01～7.00 近端部着丝点区 (subterminal region) st 7.01以上 端部着丝点区(terminal region) t ∞ 端部着丝点(terminal point) T 2、实验步骤 （1）测量：染色体、长臂和短臂的长度，随体不计入。 每对同源染色体相对长度： 染色体相对长度＝每对同源染色体绝对长度／染色体总长度 臂比: 臂比＝染色体长臂／染色体短臂 （2）配对：根据形态、臂比值等特征配对。 （3）排列：按一定顺序将一个细胞内的染色体进行排队、编 号。 排列方式:从大到小排列；相同长度的染色体，短臂长的在前；无特殊标记的染色体（如随体）排列在前，有特殊标记的染色体（如随体）排列在后；性染色体单独另排或放在最后。 （4）剪贴：1）剪切：计数，沿染色体边缘剪下每条染色体。 把已经排列的同源染色体按先后顺序粘贴在绘图纸上。 着丝点处同一水平线，长臂向下，短臂向上，垂直粘贴。 （5）分类：依据臂比，将染色体分类。 （6）核型公式：根据染色体类型，可以将一种生物的染色体核型书写成一定公式。 如：芍药核型为：K(2n)=2X=10=xm+xSm+xSt(SAT)。 K：基本核型；SAT：具随体染色体；符号前的数字x：该类染色体数目。 （7）核型模式图的绘制： 横轴：染色体序号； 纵轴：相对长度值(％)； 零点：绘在纵轴的中部，并与各染色体的着丝点相对应。 1、将测量结果填入下表 七、作业 染色体序号 放大相片长度（mm?） 绝对长度（μm） 相对长度 臂比 染色体类型 备注 长臂 短臂 全长 长臂 短臂 全长 1 ? ? ? ? ? 2 ? ? ? ? ? … ? ? ? ? ? 大蒜核型分析参数表 2、制作染色体核型图，绘制核型模式图