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实验 十 人类染色体组型分析 实验目的： 1、了解人类外周血淋巴细胞的培养和染色 体标本的制备方法 2、了解人类染色体的形态和分组特征，学 习染色体组型分析方法 实验内容与原理： 1、人类染色体标本制作简介 人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制作技术 淋巴细胞——G0期或G1期 1960年Nowell和Morhead 植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA) 外周血淋巴细胞的培养和染色体标本制作的步骤： ⑴培养液的分装： 培养液：RPMI1640或M199、小牛血清、PHA、 肝素、双抗（青霉素、链霉素） ⑵采血：静脉采血 ⑶培养：37℃培养66～72h ⑷秋水仙素处理：秋水仙素→分裂阻止剂 ⑸低渗处理：使红细胞破碎，白细胞膨胀 ⑹离心：收集白细胞 ⑺固定：固定液——甲醇：冰醋酸=3：1 ⑻离心、再固定： ⑼再离心：弃上清，留白细胞 ⑽制片： ⑾染色：Giemsa染液 ⑿镜检： ⒀封片： ⒁显微摄影→进行核型分析 2、人类染色体组型分析 *核型（karyotype) *组型 (idiogram) *染色体组型分析 （1）染色体的数目 人类染色体2n=46 核型：正常男性—— 46，XY 正常女性—— 46，XX 人类染色体按其形态大小分7组：A、B、 C(X)、D、 E、F、 G(Y)，其主要特点和鉴别要求如下： 染色体的排列规则： ①染色体的大小，大→小 ②着丝粒位置，中部→端部 （2）染色体的长度及着丝粒位置 1 μm：微型染色体 1~4 μm ：小型染色体 4~12 μm ：中型染色体 12 μm ＜ ：大型染色体 ①相对长度: ②臂率: 1.01～1.70 中部着丝粒染色体m 1.71～3.00 近中着丝粒染色体sm 3.01～7.00 近端着丝粒染色体st 7.01 ～∞ 端部着丝粒染色体t ③着丝粒指数 （3）随体及次缢痕的有无 实验材料与用具： *人类染色体照片（复印） *剪刀、胶水、组型分析报告纸 实验步骤： 1、染色体分组编号 了解各染色体的特点 一个照片作对照，另一分组编号用 2、核对、调整、粘贴 着丝粒在横线上，p在上q在下 3、分析结果 作业： 人类染色体组型分析报告 姓名： 日期： 材料： 结 性染色体 常染色体 2n 果 对照照片 1
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