如何正确理解自身抗体实验室检测结果.docVIP

如何正确理解自身抗体实验室检测结果 1. 自身抗体滴度与疾病的相关性 有些自身抗体是高特异性指标。如抗Sm抗体对SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体对AIH等，一旦出现阳性（即使是低滴度），基本上就可做出诊断。但如果这些指标为阴性，也不能排除相关疾病的存在。相反有些指标虽然在疾病中的阳性率比较高，但特异性差，在很多疾病甚至健康人群中均可出现阳性（如ANA），这种抗体只有在高滴度时，才对相关疾病有诊断意义。自身抗体的滴度不仅对疾病诊断非常重要，并且有些抗体的滴度(如抗dsDNA抗体)与疾病的活动度密切相关，可用于疗效和病程监控。 2. 关于抗核抗体(ANA)的滴度范围 检测ANA的标准方法为间接免疫荧光(IIF)法，最好用Hep-2细胞和灵长类肝冰冻组织切片作为检测基质。我科实验室采用的是德国欧蒙公司Hep-2/猴肝检测ANA间接免疫荧光试剂盒。其起始稀释度为1:100，滴度超过1:320时，则提示自身免疫性疾病。由于不同检测系统的起始稀释度和滴度系统不同，检测到的滴度数值不能直接进行比较。对ANA的结果不仅要关心其定性和滴度结果，同时还应了解所用检测系统的实验基质和起始稀释度（正常参考范围）。我科实验室ANA (IIF)的临界值(起始稀释度)为1:100。 在正常人群中ANA阳性率3-15%，抗体滴度较低，在年龄大于60岁的正常人群中ANA阳性率可高达10-37%。 ANA滴度及临床意义如下： ANA滴度 荧光强度 临床意义 1:100 - ANA阴性，血清标本中未检出抗核抗体。 1:100 (+) 可疑阳性，继续追踪观察。少数正常人群也可能阳性。 1:320 + 弱阳性，提示可能存在相关疾病。极少数正常人也可能阳性。 1:1000 ++ 中等阳性，提示可能存在相关疾病。 1:3200 +++ 强阳性，高度提示存在相关疾病。 1:10000 ++++ 很强的阳性，高度提示存在相关疾病。 3. 自身抗体检测方法对结果的影响 不同的检测方法对实验结果有一定影响，如抗dsDNA抗体检测常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和间接免疫荧光法(IIF)。这三种方法所能检测的抗体的亲和力差别很大，放射免疫法的特异性最高，IIF次之，ELISA较差。因此ELISA检出抗dsDNA阳性时，应用其它方法确认。 4. 自身抗体流行病学资料的积累 在IIF检测时，很多荧光模型相对应的靶抗原尚不清楚，且这些荧光模型的临床意义不明确。随着对自身免疫性疾病及其相关自身抗体研究的深入，越来越多的以前认为没有临床意义的抗体成为新的研究焦点。因而对于这些结果，实验室也应该报告，以引起临床的重视，通过临床和实验室的共同努力，不断积累这些荧光模型的流行病学资料。 5. 为何患者ANA阳性，却无明显临床症状？ ANA阴性结果提示患者体内不存在抗核抗体。若患者仅仅出现ANA阳性结果而无其他临床表现或指征，则并不提示自身免疫性疾病。主要原因如下： 1）ANA在健康人群中的阳性率约为3-15%，而且ANA的产生与患者的年龄相关，年龄在65岁以上的健康人群ANA阳性率可高达10-37%。另外健康人群在感染病毒的情况下，也可能出现ANA阳性，但这些抗体多为短暂出现。 2）一些药物治疗可能引起ANA阳性。因此ANA阳性需结合患者用药情况综合判断。 3)一些特殊疾病（如肿瘤）也可能导致ANA阳性。 目前已有的研究表明，自身抗体往往早于临床症状出现。对于SLE患者而言，至少有一种以上SLE相关自身抗体在临床诊断前即已出现（最早达9.4年前，平均为3.3年），而且抗体与疾病特异性越高，出现的时间越晚。另外，随着SLE病情进展，抗体产生的数量逐渐增加（见参考文献[1]）。 6. 如何认识间接免疫荧光法ANA阴性，而印迹法靶抗原（SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等）结果阳性的实验结果？ 客观上不同的检测方法学之间存在敏感度和特异性的差异。因此针对上述问题应根据靶抗原的实际结果，进行具体情况具体分析。 1）由于SSA和Jo-1抗原在真核细胞中的表达量不高，而且细胞固定剂对于抗原结构也可能产生影响，因此基于培养细胞作为基质的间接免疫荧光法绝非抗SSA和Jo-1抗体的最佳检测方法（见参考文献[2]）。 2）抗线粒体M2抗体对PBC疾病的诊断具有良好的敏感性和特异性。有研究表明临床明确诊断的PBC患者样本，即使应用大鼠肾检测抗线粒体M2抗体也可能出现荧光法阴性而重组抗原方法阳性的结果（见参考文献[3]）。 3）对于dsDNA抗体临床检测，由于不同实验体系中所应用的抗原来源不同、抗原呈现形式不同以及反应条件不同等因素的影响，因此不同实验方法学之间的结果并不具备可比性（见参考文献[4]）。 7. 单独出现Ro52抗体阳性是否具有临床意义？ 目前已有的研究表明，抗SSA抗体主要提示干燥综合症、SL