菊花的组织培养一MicrosoftPowerPoint幻灯片讲义.pptVIP

专题3 植物的组织培养技术 植物组织培养： （一）植物组织培养的原理——细胞全能性： 概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成 完整新个体的潜能。 基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有全套遗传物质，都有发育成为完整 个体所必需的全部基因。因为它们都是 由同一个受精卵细胞有丝分裂分化而来。 表达条件： 离体条件 无菌操作 适宜物质的诱导和调节（植物激素） 适宜的营养物质 温度、pH、光照等条件的控制 问题：比较脱分化与再分化 常用的植物激素： 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势。 激素的使用顺序、使用量及比例影响植物细胞的发育方向。 4、环境条件：pH、温度、光照 pH控制在5.8左右 温度控制在18－22℃ 每日用日光灯照射12h 5、无菌技术：是植物组织培养能否获得成功的关键 导学案P62 * 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素（细胞分裂素、生长素）和其他外界条件（温度、pH、光照、无菌等）的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株，这种培育新植株的方法，叫做植物的组织培养。 基础知识： 在生物体内，细胞不能表现全能性。原因：基因的选择性表达。 全能性大小的比较：受精卵〉生殖细胞〉体细胞 细胞全能性的现：细胞---个体 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 （二）植物组织培养的基本过程 愈伤组织 脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞 产生愈伤组织的过程，称为植物细胞 的脱（去）分化 。 再分化：由脱分化产生的愈伤组织重新分化形 成根或芽等器官的过程，叫做再分化。 外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。　 愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞，通 过细胞分裂形成的细胞团，叫做愈伤 组织。 特点：细胞排列疏松而无规则，高度液泡化；呈 无定形状态的薄壁细胞。 （1）不同的植物，培养的难易程度差别很大： ①烟草和胡萝卜的组织培养较为容易； ②枸杞愈伤组织的芽诱导比较难； （2）同一种植物材料的年龄、保存时间的长 　　 短等也会影响实验结果。 　　菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 （三）影响植物组织培养的因素： 1．植物材料的影响： 2、离体的植物组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配制不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等 C、有机物、植物激素 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持培养基的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 3．植物激素的影响： 生长素、细胞分裂素和 赤霉素。 分化频率高 同时使用 细胞既分裂、也分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 实验结果 使用比例 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 ＝ 有利于根的分化 有利于芽的分化，抑制根的分化 促进愈伤组织生长 *