第十三章真核生物基因表达调控.pptVIP

组成型异染色质：卫星DNA，端粒 兼性异染色质：如雌性哺乳动物的X染色体，在早期胚的时候没有活性，进入到生殖细胞有活性。 * 组蛋白与DNA抑制结合，为负调控 它与DNA的结合为“先占模型”，转录因子和组蛋白谁先占据调控位点，如5SrRNA与组蛋白结合，TF111A不能激活此基因 * 在雄性果蝇超活性的X染色体上，有高乙酰化H4，在雌性哺乳动物中，低乙酰化H4 HAT组蛋白乙酰化酶 HDAC：去乙酰化酶 * CpG岛：是一些基因5’端存在的序列，GC含量为60% 在若干基因里，CpG岛从启动子的上游延伸到下游转录区中，然后逐渐消失 持家基因都有CpG岛，占总量的一半 * 正调控因子结合区、负调控因子结合区： 上游启动区域调控元件 * 上游调节元件种类上讲比原核生物多 * 1960年，科学家首次在猴子体内发现了SV40。随后，科学家又在脊髓灰质炎试剂中发现了SV40，其原因是实验室在培养疫苗时使用了从猴子体内分离出的肾脏细胞。 * MAR核基质结合区，不同细胞核基质与DNA结合区不同 * * cAMP依赖蛋白激酶，简称激酶A(PKA——protein kinase A)。cAMP发挥各种效应主要是通过激活它来实现的。它的重要作用是使某些基因调节蛋白磷酸化，进而激活特定的基因转录。 * 染色质重塑：核小体在真核细胞DNA上重新定位的过程。 * （2） ZINC FINGER A. Cys2/His2, 经典 ~23aa Cys- X2-4- Cys-X3-Phe- X5 -Leu- X2 -His- X3 -His Cys，His与Zn++结合形成4面体结构，使中部的氨基酸回折成环，凸出如手指 中部芳香族氨基酸保守，疏水 串联重复排列，两指间7-8aa 锌指数目多少不等 -COOH，每隔7个氨基酸出现一个Leu，所有Leu出现在同一侧面，成直线排列，形成疏水面 -NH2,富含碱性氨基酸，＋，碱性DNA结合域 (3) LEU ZIPPER 依靠Leu的疏水作用,2个helix 相互缠绕，形成拉链结构 蛋白质如何识别DNA特定序列？ 蛋白质的识别螺旋嵌入DNA大沟中 非特异性结合：结合部位附近的正电区域（由带正电的氨基酸侧链组成），与DNA主链的PO4离子产生静电作用，二者距离远，作用弱 特异性结合：当到达靶位点时，蛋白质分子上特定位点上的H供体和受体的空间取向正好于DNA靶位点互补，结果形成氢键，使二者距离缩短（1.0~1.5nm），作用力增强106倍 螺旋3 嵌入大沟中,特异结合 氨基端手臂伸到DNA背后, 在大沟中与DNA接触 诱导型转录因子活性调控 --热休克应答 1 HSP（heat shock protein) aa序列高度保守 蛋白质功能高度保守 是一种分子伴侣chaperone 2 hsp 核苷酸序列高度保守，如人与E.Coli40～60％ 多基因家族，多拷贝，成簇存在 大部分无内元，如hsp70，转录后不须剪切即可产生成熟mRNA，适应需要 hse, HEAT SHOCK ELEMENT 位于hsp上游 核心序列nGAAn，首尾排列 －GAANNTTCNNGAA－ 保守 ，几乎存在于所有的hsp中。把hse连接在其它基因的上游，该基因可获得热诱导性。hse在进化中的保守性是热休克应答普遍性的分子基础之一 HSF, HEAT SHOCK FACTOR，hse 结合蛋白，热激转录因子 DNA结合区：3个螺旋，形成疏水区 多聚化区：4个Leu拉链，三聚体有活性 C末端（452～488）保守区 5 热休克应答的调控机制 常温下，HSF在体内以单体存在，不与DNA结合（无活性） 这是由于拉链1,4相互作用，加上Hsp70, hsp90的共同作用，使HSF保持单体 热激后，大量变性和 错误折叠的蛋白质出现, 与Hsp70, hsp90竞争结 合,使拉链区暴露, 多聚 化，与hse结合 HSF解离，形成HSF单体 多聚化 与hse结合 产生HSP HSP积累，可与HSF结合 脱离hse 热激 shen256 热休克应答现象普遍存在热休克基因家族是迄今被发现的最保守的遗传系统 热休克反应可被多种因素诱导，应激反应 Κ基因结合核因子（NF-ΚB） NF-κB位于细胞质中，与κB抑制蛋白（IκB）结合，生成NF-κB/IκB，处于失活状态 在外界多种因素作用下（化学、物理等），NF-κB/IκB解离，从而激活NF-κB，再通过核孔复合体进入细胞核，诱导靶基因表达 NF-κB IκB NF-κB/IκB 化学、物理 NF-κB NF-κ