高压氧对缺氧缺脑损伤新生鼠细胞凋亡及兴奋性氨基酸的影响.pdfVIP

中文摘要 高压氧对缺氧缺血脑损伤新生鼠细胞凋亡及兴奋性 氨基酸的影响 摘 要 Brain 缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic．Ischemic Damage， HIBD)是由于脑组织供血不足引起脑代谢变化而导致的脑组 织损害。所谓缺氧指血供中的氧含量减少，缺血指脑血流的 灌注量减少，缺氧缺血互为因果…。新生儿HIBD是指围产 期窒息所导致的严重并发症，是导致儿童神经系统伤残的常 见原因之一，积极防治HIBD对降低死亡率、减少神经系统 后遗症的发生具有重要的临床意义。而复制与人类HIBD发 病相近的动物模型是上述研究的一个重要基础，对深入研究 HIBD的病理生理过程、发病机制具有重要的现实意义。 HIBD的发病机制尚不十分明确，但细胞坏死和凋亡是直接 导致神经功能缺失的最终原因，因此，阻止脑细胞的凋亡成 为保护神经细胞功能的重要措施。 amino 兴奋性氨基酸(Excitatoryacid，Eaa)主要指谷氨酸 (Glutamate，Glu)年l：l天门冬氨酸(Asparticacid，Asp)，是中枢神经 系统中兴奋性突触的主要神经递质。大量研究证实谷氨酸不 仅具有营养神经、促使神经元生长发育及轴突生长等重要生 理作用，同时也是一种神经毒素，在HIBD的脑损伤中发挥 着重要作用【2】。Ca2+内流以及自由基积聚是Eaa兴奋毒性的 主要机制，主要产生下列病变：(1)使细胞膜、细胞器膜的不饱 和脂肪酸发生脂质过氧化反应，降解磷脂并使其活性丧失；(2) 中文摘要 使细胞膜对Na+、Ca2+以及大分子物质的通透性增加，细胞 发生兴奋毒性水肿和兴奋性递质释放；(3)使细胞的生物酶活 性丧失或转化为对细胞有害的酶；(4)破坏线粒体呼吸功能， 能量生成障碍，溶酶体裂解，大量溶酶体溢出胞质，促使神 经元细胞白溶、坏死。但是与细胞凋亡的关系如何?尚未见 报道。 在细胞凋亡的调控中，Caspase家族(半胱氨酰天冬氨酸 特异性蛋白酶)是一类在细胞凋亡程序中起关键作用的蛋白 水解酶家族，它与细胞凋亡的关系是近来研究的一个热点。 研究证实Caspase．3是细胞凋亡过程中最重要的蛋白酶，是多 种死亡受体介导凋亡途径的共同下游效应部分，是细胞凋亡 蛋白酶级联反应的必经之路。 高压氧(hyperbaric 摄取率和利用率，增加血氧含量，提高血氧分压，增强氧的 弥散能力，从而改善脑组织的微循环和有氧代谢，保护缺氧 缺血性脑组织。而且，有研究显示HBO能抑制执行型 Caspase．3的激活【31，抑制缺氧缺血性脑细胞的凋亡。在此过 程中，能导致脑细胞死亡的兴奋性氨基酸是否也参与了脑细 胞凋亡的过程，尚不明确。 本实验拟以7d龄SD大鼠作为研究对象，制备脑半球 8h、24h、48h、96 型在HBO治疗前后、治疗后1 h等不同 时间点海马区和皮层区细胞Caspase．3活性蛋白的表达情况 对缺氧缺血性脑损伤是否有保护作用?兴奋性氨基酸是否 参与了高压氧抑制脑细胞凋亡的过程，为临床应用HBO治 中文摘要 疗HIBD提供有力的理论依据。 目的： 1动态观察HIBD及HBO治疗后大鼠血清中兴奋性氨基 酸水平及脑细胞凋亡的变化及相关性。 2探讨HBO减轻HIBD大鼠脑细胞凋亡的可能机制。 方法： l动物模型的建立：按照文献资料【4]建立标准SD大鼠缺 氧缺血性脑损伤(HIBD)模型，并随机分为三组：假手术组(24 只)，HIBD模型组(24只)，HBO干预组(24只)。 1．1假手术组：仅在乙醚麻醉后做颈部正中切口，分离 出左侧颈总动脉后不进行结扎即缝合伤口，不进行缺氧处 理。 1．2