银杏苦内酯B对AP大鼠胰腺组织p38MAPK和PTK活性的影响.pdfVIP

中文摘要 银杏苦内酯B对SAP大鼠胰腺组织 p38MAPK和PTK活性的影响1 摘 要 目的：莺症急性胰腺炎(SAP)不仅仅是胰腺局部疾病， 除了胰腺本身的水肿、出血、坏死，常出现全身性炎症反应 SAP高死亡率的主要原因。促炎性介质水平升高及抗炎性介 质水平下降是SAP病情发展过程中导致SIRS及进一步发生 MOF的关键。炎性介质的基因表达为一系列信号转导机制所 调控，阻断信号转导通路的某一环节，抑制促炎性介质的产 生，有助于减少MOF的发生，减轻SAP的严重程度，降低死 B)是从银杏叶中提取的少量 亡率。银杏苦内酯B(Ginkgolide 萜内酯的--4中。它是血小板活化因子(PAF)的特异性拮抗剂， 可以竞争性的与PAF受体(PAY 与SAP病情发生发展的重要促炎性介质，其主要生物学效应 有促进血小板聚集，促进白细胞趋化、脱颗粒和氧自由基形 成，介导其它炎性介质和细胞因子的合成与释放等。PAF的 生物学效应是通过与细胞膜上的特异性PAFR结合，激活细胞 内多条信号转导途径，包括磷脂酰肌醇信号通路，丝裂原活 化蛋自激酶(MAPK)信号通路中的细胞外信号调节激酶 以实现的。其p38MAPK信号通路的主要功能是在转录后水 平调控促炎细胞因子的基因表达，参与炎症反应过程。已有 课题木源：国家自然科学璀金，编d 中文摘要 大量体内外实验证明，胰腺炎ft寸p38MAPK活性明显升高，同 时伴随多种细胞因子基因表达的上调和血清水平的增高；应 用p38MAPK抑制剂进行干预能明显降低血淀粉酶水平，减少 白细胞浸润，抑制细胞因子产生，减轻胰腺组织损伤，并且 能够提高实验动物的生存率。PAFR属于G蛋白偶联受体 通路问存在交叉对话作用，所以PTK可能在PAF信号转导过 程中发挥作用，但目前尚无相关报道。银杏苦内酯B作为PAF 的特异性拈抗剂，用于实验性SAP的治疗已取得良好疗效， 但其作用机制尚不明确，对此还缺乏系统的研究。本研究我 们用Western 讨银含苦内酯B治疗SAP的分子机制，为国药开发和临床应 用提供理论依据。 共18组。通过向胆胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠(1mL·k91)， 制各成SAP模型，NC组开腹后仅翻动十二指肠并触摸胰腺数 SAP组股静脉注射等量生理盐水。分别在注射5％牛磺胆酸钠 织。一部分胰腺组织以中性缓冲甲醛固定，石蜡包埋切片后 HE染色制片，观察胰腺组织的病理学改变；另一部分以预冷 的生理盐水冲沈后切割成小块，于液氮中速冻过夜，然后转 移至一80。C超低温冰箱妥善保存。采用全自动生化分析仪 中文摘要 检测血浆淀粉酶。用Westernblot法检测p38MAPK的表达， 性。所有数据用均数4-标准差(x±s)表示，组间差异比较用方 差分析，P0．05为差异有统计学意义。全部统计分析采用 SPSSl】．5软件完成。 结果：(1)胆胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠后，各时 问点均可见胰腺组织充血、水肿、出血、坏死和血性腹水， 并随时间延长胰腺组织病变程度加重、腹水量增多。大鼠 正常。(2)在各时问点，SAP组和BN组血浆淀粉酶水平均 MAPK在制模后即迅速增加，3h达高 腺组织中磷酸化的p38 峰，6h及12h仍维持较高水平，在24h p38MAPK磷酸化水 活性于制模后lh即明显升高，至24h仍维持在较高水平。 在各时间点，SAP组和BN组胰腺组织中PTK活性均较NC 组为高(P0．05)，但SAP组及BN组间没有差别。 结论：(1)用胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备成的 Wistar大鼠SAP模型，方法简便、重复性好、成功率高，是 一种较理想的SAP动物模型制备方法。(2)银杏苦内酯B 中文摘要 能够减轻胰腺组织损伤，有效降低血浆淀粉酶水平，对SAP 发挥一定的治疗作用。 可能参与了SAP的发病过程。(4)银杏苦内酯B能够部分 PAF信号转导通路的成分之一，其治疗SAP的机理可能与阻 苦内酯B不能降低胰