苏云金芽孢杆菌工程菌伴孢晶体形态发生.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 0’ )# 年 月 $$ %$ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,’-./ $$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 苏云金芽孢杆菌工程菌伴孢晶体的形态发生 ， % 3 3 邵宗泽 郭延奎 喻子牛 % （国家海洋局第三海洋研究所 厦门 32%$$# ）（山东农业大学生命科学学院 泰安 ?%$%1） 3 华中农业大学生命科学与技术学院 武汉 ） （ !3$$?$ 摘 要：苏云金芽孢杆菌在有帮助蛋白存在的情况下杀虫晶体蛋白获得了超量表达。通过透 射电镜观察了@/A%B+ 超量表达工程菌伴孢晶体的形态发生以及不同芽孢发育时期的晶体形 态变化。结果表明，该工程菌的伴孢晶体在细胞不对称分裂的隔膜形成前就已出现，而且晶 体发生的部位与芽孢无关。但晶体在形成初期往往靠近母细胞膜。观察结果还表明，大量表 达的晶体蛋白不能马上参与到晶体合成，晶体形成的最佳时期是芽孢皮层形成期。母细胞大 量液泡的产生与消失可能与晶体形成有关。此外，在超量表达工程菌中， 蛋白能在一 @/A%B+ 个细胞内形成多个伴孢晶体，这在天然菌株中是罕见的。 关键词：苏云金芽孢杆菌，工程菌，伴孢晶体，形态发生 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） C53 B $$$%42$5 $$ $#4$###4$2 苏云金芽孢杆菌（ ， ）是目前最为重要的一种杀虫细菌，它的主 !#$%%’ ()*$+,$-+’$’ D, ［］ % 要杀虫成分是由杀虫晶体蛋白构成的伴孢晶体（ ） 。晶体发生是 制 E9/9;E’/9( +/A;,9(; D, 剂生产中尤为关注的问题，晶体能否形成也是目前人们在开发D, 工程菌中关心的问题之 ［，］ 一 3 。而目前人们关于晶体发生知识主要来自于野生菌株。在前人的研究中发现，库斯 塔克亚种（ ）的野生型菌株的伴孢晶体是在前芽孢内卷时在靠近前芽孢外膜处形 .*’(.$ 成；而以色列亚种（ ）的伴孢晶体发生在前芽孢隔膜形成之前，比库斯塔克早 $’*-%-+’$’ F ［］ ! 3 。 在以前的实验中，我们将来自以色列亚种的帮助蛋白基因/01 与来自库斯塔克亚种 ［］ 的