精浆的生化检验技术(三修)..pptVIP

精 浆 生 化 检 验 郑大三附院检验科 袁恩武 二00八年七月 一 、精浆的来源及作用 二、 精浆α-葡萄糖苷酶测定 三、 精浆果糖测定 四、 精子顶体酶的测定　 五、 其他生化项目测定 一 、 精浆的来源及作用 男性生殖系统的结构 男性生殖腺分泌功能 睾丸:精子、雄性激素、转铁蛋白、 附睾 : 中性α-葡萄糖苷酶、肉毒碱、甘油磷酸胆碱、唾液酸等，与精子的功能性成熟有关 精囊腺: 分泌果糖、前列腺素等，呈碱性 前列腺: 分泌酸性磷酸酶、柠檬酸、谷氨酸转肽酶、PSA、锌、镁等，其分泌物呈酸性 精液的组成和来源 精液是由精子和精浆组成的混合物 精子产生于睾丸 精浆产生于附睾、前列腺、精囊腺和尿道球腺等附属腺体 正常精液中精子占5%，精浆占95% 在精浆中约30%来自前列腺，60%来自精囊腺，5-10%来自于附睾及尿道球腺 正常精浆应具备 精浆量≥2.0ml 外观和粘稠度都正常 PH值7.2-7.8 精浆各项生化指标正常 精液WBC＜ 1×106/ml 细菌培养阴性或细菌计数＜1000/ml 精浆主要化学成分 水:约占90%以上 糖类:果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖等 蛋白质:白蛋白及非酶蛋白质 脂类:包括胆固醇、睾酮、前列腺素等 酶蛋白:酸性磷酸酶、透明质酸酶、糖苷酶、精素、纤溶酶原激活剂等 肽类激素：如FSH 、LH、催乳素等 胺类：如精胺、亚精胺、精胺素等氨基酸：如精氨酸、谷氨酸等20多钟 有机酸及有机碱：如柠檬酸、肉毒碱、甘油磷酸胆碱、乳酸等 无机离子：锌、镁、钙、铜、钾、氯、钠等 精浆的生理作用 作为一种介质把精子输送到女性生殖道内，为 精子提供营养物质 参与精液的凝固和液化 精浆组成一个适当的pH值和渗透压环境，具有一定的缓冲能力，以适应精子活动的需要 精浆中含有调节输卵管及子宫活动的物质，同时还含有使宫颈粘液水解的物质。 精液的凝固与液化 精液刚射出时为一粘性、略呈灰黄色的液体，射出后立即呈胶冻样凝块，5～20min后又会自动液化，并仍呈一定粘度。当精液射于阴道内5min可以完全液化，比体外液化的时间为快 精液液化一旦形成，精子在此液状环境中才开始有效的自由活动，且有充分活动力，可由阴道进入宫颈、子宫及输卵管，最后与卵子结合而致孕。 精囊（凝固酶）和前列腺（液化因子、PSA）在精液的凝固和液化过程中起重要作用 男性不育疾病中精浆生化指标的改变 精浆生化检验的目的 精子功能指标：评价精子受孕能力 用于男性生殖道炎症的诊断 了解副性腺功能 确定梗阻性无精子症及梗阻部位 男科实验室开展的精浆生化项目 精浆α-葡萄糖甘酶测定 精浆果糖测定 精浆酸性磷酸酶的测定 精子顶体酶的测定 精浆锌的测定 精浆乳酸脱氢酶X同工酶的测定 精浆柠檬酸定量测定 原理 P-硝基酚吡喃葡糖苷 （底物） 对硝基酚（产物） 淡黄色物质，在405nm波长有最大吸收峰 加酸是抑制酸性α-葡萄糖甘酶 ，保护中性α-葡萄糖甘酶 试剂组成 酸性抑制剂 600μl×1瓶 糖苷酶抑制剂（冻干粉） 1瓶 底物（冻干粉） 2瓶 终止液 50ml×1瓶 标准品（1~5） 各2.5 ml 质控液 100μl×1瓶 底物溶解液 5 ml×1瓶 实验设备及用具 酶标仪 低速自动平衡离心机 微量水平振荡器 水浴箱 （37℃） 精密移液器（加样枪） 0.5~20ul、50~200ul、100~500ul、 200~1000ul 石英定时钟 实验操作方法 试剂准备 糖苷酶抑制剂冻干粉以120μl蒸馏水溶解，4℃可使用20天，分装保存-20℃可长期使用（切勿反复冻融） 每瓶底物冻干粉以2.2ml底物溶解液充分溶解，分装保存 溶解后的底物液，4℃保存可用5天，-20℃保存可用数月（切勿反复冻融） 标本准备 记录受检者一次射精的精液总量(ml) 精液液化后以3000g离心10分钟，保留精浆 若样本不能立即测定，可以E