巴西狼果..pptVIP

Company Logo LOGO Antiproliferative activity of Solanum lycocarpumal kaloidic extract and their constituents, solamargine and solasonine,in tumor cell lines 鬃狼爱吃巴西狼果，而巴西狼果正是得名于鬃狼，英文里就叫做Wolf Apple，它是茄科茄属的植物。巴西狼果是在巴西东南部和中西部的巴西热带草原中被发现的。它是具有2-3.5米高度的灌木，长着粗糙多刺的叶子，可结出能食用的果实，果实颜色是绿色的，直径可长达15cm，看起来像西红柿，吃起来像茄子。毒物学研究表明巴西狼果对动物有毒性效应。 肿瘤(Tumor) 是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的新生物。学界一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。前者生长缓慢，与周围组织界限清楚，不发生转移，对人体健康危害不大。后者生长迅速，可转移到身体其他部位，还会产生有害物质，破坏正常器官结构，使机体功能失调，威胁生命。 癌症(Cancer)，亦称恶性肿瘤(Malignant neoplasm)，为由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分，导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。 癌症是世界上死亡率很高的一种疾病，主要的治疗方法包括化学疗法和放射疗法。 黑色素瘤：源于皮肤,粘膜,眼和中枢神经系统色素沉着区域的黑素细胞的恶性肿瘤。 结肠癌：结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤，好发于直肠与乙状结肠交界处，以40～50岁年龄组发病率最高，男女之比为2～3：1。发病率占胃肠道肿瘤的第3位。 乳腺癌：乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99%发生在女性，男性仅占1%。 宫颈癌：宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤。原位癌高发年龄为30～35岁，浸润癌为45～55岁，近年来其发病有年轻化的趋势。 肝细胞癌：是最常见的致命的恶性肿瘤，在世界排名第五。肝癌对化疗药物有高度耐药性，且没有确切有效的化学药品。70%继发于肝炎、肝硬变，任何年龄均可发病，更多见于中、老年，男性多于女性。 胶质母细胞瘤：肿瘤位于皮质下，成浸润性生长，常侵犯几个脑叶，并侵犯深部结构，是一种脑部肿瘤疾病。 将新鲜巴西狼果果实切碎，并在40℃条件下使用空气环流的烘箱将果实干燥。生物碱成分是通过酸提碱沉法获得的。将巴西狼果果实的干粉（1千克）加入到盐酸（0.5M）中并过夜浸渍，然后进行过滤和离心分离，重复此操作过程三次。接着，通过加入NaOH(0.3M)碱化含水的酸萃取液，使pH值达到12.0。静置足够的时间使生物碱完全沉淀。沉淀后，将上清液轻轻倒出，使用离心机分离湿润的沉淀物质，合并，并在烘箱中于40℃下干燥。将干燥的生物碱粗提物在刀式粉碎机下粉碎，并且在室温（25℃）的条件下加入蒸馏乙醇中进行超声波浴。将不溶物过滤，乙醇溶液进行减压浓缩，冻干，提供了生物碱提取物（9.2克）。 生物碱成分的提取 色谱分析是在一个高效液相色谱配有二极管阵列检测器（HPLC-DAD）（岛津制作所）以及岛津CLASS-VP版本的5.02软件，使用一个Zorbax SB-C18，250×4.6毫米，柱（安捷伦）。配糖生物碱的分析，采用梯度洗脱方法，用乙腈/磷酸盐缓冲液（0.01M）在pH7.2（36.5:63.5）的条件下进行。流速1毫升/分钟时洗脱20分钟，检测设定在200纳米。在实验中，巴西狼果果实配糖生物碱提取物（SL）溶解于无菌蒸馏水中。 高效液相色谱-二极管阵列检测器分析 图二：巴西狼果的配糖生物碱提取物显示澳洲茄碱(SS)和澳洲边茄碱（SM）在200nm处的高效液相色谱图 澳洲边茄碱与澳洲茄碱的分离是通过在甲醇高效液相色谱级中溶解巴西狼果果实配糖生物碱提取物（SL）并将混合物加入反相C-18硅胶色谱柱中，接着用甲醇-水进行梯度洗脱。获得的各级馏分通过薄层色谱法进行分析并将相似的馏分合并。澳洲茄碱(SS)和澳洲边茄碱（SM）的纯化是利用由乙腈-水36:65的梯度洗脱系统，通过反相高效液相色谱法实现的。对分离出来的复合物进行电喷射液相色谱/质谱法和高效液相色谱法分析，将两种复合物与真实标准进行比较来确定复合物的化学结构。其纯度由高效液相色谱和核磁共振测定估计会高于95%。 在实验中，澳洲边茄碱（SM）和澳洲茄碱（SS）被溶解于无菌蒸馏水中。 澳洲边茄碱与澳洲茄碱的分离 图一：澳洲边茄碱与澳洲茄碱