干细胞移植..pptVIP

* 造血干细胞移植 和全身照射 解放军第307医院肿瘤科 俞受程 目的：攻克癌症 实验肿瘤学- 随着 血液学- 细胞生物学- 发展 免疫学- 促进和提高各种肿瘤的治疗效果 代表性方法 1.喜树碱衍生物，紫杉类药物-新的作用机制 2.克服耐药性药物的联合应用 3.大剂量生物调节剂的临床应用 4.使用G-CSF或GM-CSF（细胞因子） 5.采用造血干细胞移植术-超大剂量放、化疗 成人进行性复发肿瘤放化疗疗效分级 偶见 偶见 20～40 C 0 0 0 D 10～20 10～40 40～80 B ＞30 ＞40 ＞80 A 长期生存率（%） CR（%） 有效率（%） 成人进行性复发肿瘤标准剂量的疗效 D（D） 肾癌 B（C） 卵巢癌 C（C、D） 大肠癌 A（B） 胎儿性肿瘤 C（C、D） 肝癌 B（C） 小细胞肺癌 C（C、D） 非小细胞肺癌 A（B） 绒毛膜癌 D（D） 胰腺癌 B（C） 乳腺癌 C（C、D） 胃癌 A（B） 恶性淋巴瘤 B（C） 子宫颈癌 A（B） 急性白血病 疗效级别 肿瘤种类 疗效级别 肿瘤种类 提高肿瘤放化疗剂量和强度可提高疗效, 但免疫功能低下、骨髓抑制是强烈 放化疗的后遗症 常见感染和出血 造血干细胞移植的意义 1.加速造血恢复和免疫功能重建 2.缩短住院日期，减少医疗费用 3.拯救一部分标准治疗无效的病人 造血干细胞移植治疗有效的病种 多数有效病种 1.急性白血病 2.恶性淋巴瘤 3.乳腺癌 4.神经母细胞瘤 复发、晚期和高危病例 造血干细胞移植治疗有效的病种 病例少但有效的病种 1.多发性骨髓瘤 2.胎儿性肿瘤 3.卵巢癌 造血干细胞移植治疗有望产生疗效的病种 1. 小细胞肺癌 2. 头颈部肿瘤 3. 横纹肌肉瘤、骨肉瘤等 4. 其他（脑肿瘤等） 造血干细胞分类 骨髓（自体和异基因） 外周血液（自体和异基因） 胎肝细胞 脐带血 造血干细胞采集、保存、动员剂应用、活性测定均已规范化 造血干细胞来源 胚胎干细胞发育而来 特征：1.高度自我更新、自我复制能力 2.进一步分化为各系祖细胞 3.可长期维持在非增殖状态 4.随着干细胞分化逐渐减弱和消逝 造血干细胞特点 表达CD34+抗原 骨髓中含量少，占有核细胞1%～2% 外周血含量更少，占单个核细胞0.1% 脐带血含量丰富，但总数较少 脐带血移植所面临的问题 1. 单个胎盘脐带血干细胞数量有限 2. 极易污染母亲淋巴细胞发生致命的 GVHD占3% 3. 易肿瘤复发 4. 发生遗传性疾病有较高的危险性 造血干细胞移植的方法 骨髓造血干细胞的采集 1.采集前准备 2.器械和药品准备 3.骨髓采集 造血干细胞分离、采集和纯化 分离：分离机 CS3000 plus 循环血量10L，1次/日，2～3次采集即可 纯化：免疫法；FACS分离法； 阴性选择，阳性选择，阴性+阳性同时并举 体外扩增：造血干细胞扩增30～1000倍 集落形成细胞数增加41～190倍 体外净化：物理、药物、生物、免疫学方法 造血干细胞采集数量及其活性测定 单核样细胞（MNC）＞2×108/Kg CFU-GM ＞0.5～1. 0×105/Kg CD34+细胞＞5×106/Kg 外周血干细胞移植的特点 （与骨髓移植相比较） 1.容易收集，无需麻醉； 2.造血功能重建快，并发症低； 3.骨髓瘤细胞浸润亦可移植； 4.动员后可获得足量的干细胞 外周血造血干细胞采集 动员剂 骨髓抑制性细胞毒药物-CTX、ADM 细胞生长因子- G-CSF 大剂量化疗+G-CSF 关于CD34+细胞 分子量115000高糖基化膜蛋白存在于各系幼稚的造血 细胞； CD34+细胞是一个群体-有各种亚型，各系造血干细胞大 部分存在此群体内。 特点 不表达CD34+抗原的细胞-无形成集落能力； 凡表达CD34+CD38-抗原的组分细胞-是维持长期造血的启动细胞。 CD34+细胞及其亚群的比例 骨髓最高 外周血最低 脐带血增殖能力最强 纯化CD34+细胞意义 1.了解造血干细胞增殖、分化和造血恢复； 2.去除其他细胞成分（肿瘤细胞）。 外周血干细胞采集 连续血细胞分离机-CS3000 plus连接两端肘静脉-循环通路，2-3小时可分离6000～10000ml循环血 外周血和骨髓液分离采集后有核细胞产率比较 （7.0±2.6）×1