苹果果实中糖代酶的可逆磷酸化修饰及其活性调控.pdf

攘要 蛰白磷酸化作为信号转导的重要组分参与调控各种生命活动。在过去的十年内，无 数研究结果表明，在植物细胞肉宙有火量不同种类的蛋自激酶和鬣白磷酸酶，它们的主 要功能之…就越调节代澎酶的濑瞧。本实验通过测定步}灏ATP对攀暴果实蠹糖代澍酶舱 活性影响．初步确定了几种可能受蛋白词逆磷酸化调：H的酶：蔗糖磷酸合酶、蔗糖合酶 (瑟个壤豫方内)、淀粉酶。逶遘舞l鸯羹蛋囊激酶嚣矮皇磷酸酶豹搀铡裁，然爱再测定翅步 筛选出的酶的活性，进一步证明果实细胞体系内可能存在对糖代谢酶的共价调节机制， 并对参与调节静酶髂静黉和特瞧进行翅步判断。 脱落酸(ABA)是一种具商重要生理功能的植物激索。许多研究表明ABA在果实 成熟中起到重要作用，糖卸载也受到激索(特别是ABA)的调控。本实验通过使j=}j不同浓 度的ABA对果实圆片避行活体澡育，测定各转糖代测酶的活性变化，来确定ABA是否 对苹果中糖代谢酶的活性县有调节作用。结果表明在20 ramol／L的ABA处理浓度F，酸 性转他酶、由梨游襞恁瓣露藏耱台酶(分瓣方囊懿嫩淫效应最为明显：藏耱磷酸舍酶 和蔗糖合酶活性亦有略微增加；而淀粉酶利山梨醇脱氢酶则无变化。由此推测ABA很 可能撵为信号分子，调节了活辛搴细麓内静基因表达，或者寤动了蘩些生诧爱应，避丽影 响了几种糖代谢酶的活性。 为丁验证在ABA诱导的信号转导途径中是甭有蛋自磷酸化发应的参与．本实验通 过对20Bmol／LABA处理的酶撮取液进行碱性磷酸酶处理，发现酸性转化酶和蔗糖台酶 (分解方向)的活性继续显著增加。加入蛋白激酶抑制剂后，结果与此相间，表明细胞 内的聪骥醛纯俘删鸯秘予酶活牲熬提裹。萤自磷酸酶抑涮裁篷搀瑙效采无嫂律。 作为重要的调节开关机制。强白磷酸化过程在植物界具有广泛性。但姓目前，在苹 象栗实中代寮酶受竭蛋囊可逆磷酸纯淹节澎无掇道。本实验首次在苹采果实串将ABA诱 导的信母转导过程与蛋内可逆磷酸化联系起来，初步确认了苹果果实生长发育过程中存 在糖代谢酶的共价调节机制。 关键词：爨自磷酸化，糖代漪酶，抑制剂，脱落酸(ABA)，聪磷酸化 ABSTRACT and Ptotein all rolein transduction phosphorylationplays important signal of weredifferentkinds foundoutthere the research decade，numerous regulation．Inpast in theirmainfunctionis of and cell．One kinases plant protein proteinphosphatases ofmetabolic this ATPtotreatcrude activity enzymes．Inpaper,byusing regulating onseveralmetabolic identified and thee