米根霉产L-乳优良菌株的同步辐射诱变选育及发酵特性研究.pdf

米根霉产L一乳酸优良菌株的同步辐射诱变选育及发酵特性研究 摘 要 米根霉发酵产L．乳酸具有营养要求简单、产品光学纯度高等优点，但也存 在产量不高、副产物含量较多等不足，因此优良菌株的诱变选育具有一定的现 实意义．同步辐射软x射线具有能谱宽且连续、精确可调、单色性好、可精确 计算辐照剂量等特点，可提供生物分子所具有的Ck、Nk、Ok波长的射线，在 生物学领域有着广泛的用途．本文采用同步辐射2．3nm、3．2nm、4．4nm波长软 X射线对米根霉As3．819孢子进行辐射诱变，结果表明：抽真空时间对米根霉 孢子的存活率有很大影响，时间越短存活率越高；Ck软x射线诱变存活率最 低，筛选得到的突变株最少，主要产生在高剂量区；Nk效果较好，突变株产生 在低剂量区；Ok诱变存活率最高，筛选得到的突变株最多，在不同剂量范围内 均有产生，诱变效果最佳。 采用YPD平板．大平皿点样．乳酸平板筛选得到3株突变株，经过发酵验证 确定C．60为最优突变株。通过单因素和正交试验，优化C．60突变株的发酵培 养基组成，确定其最佳培养基组成为：120 g／L葡萄塘、1g／L硫酸铵、O．3g／L 硫酸镁、O．3g／L磷酸二氢钾、0．44g／L硫酸锌。在此条件下C．60突变株发酵 72h后乳酸产量为98．4 g，L，斜面转接7代后其摇瓶产乳 g／L，乙醇产量为5．1 酸能力基本稳定。 比较C．60突变株与出发菌株5L罐发酵的结果发现：突变株乙醇脱氢酶活 力为14U／ml，降低了26．3％，乙醇产量为5．2 g，L，减少了23．8％；乳酸脱氢酶 为0．05 g／L，降低了73．7％。实验结果说明C．60突变株具有较好的发酵特性， 也进一步验证了同步辐射软x射线的诱变效果和筛选方法的可行性。 关键词：同步辐射软x射线 米根霉 选育L．乳酸 发酵特性 ofeminent irradiated Screening Rhizopusoryzae by radiationinL-lacticacid Synchronous production on and fermentativecharacter study ABSTRACT ThefermentationofL-lacticacid hassuch as byRhizopusoryzae advantages fornutritionand the requirement highopticalpure simple product，but oflow and contentof also disadvantagesoutputhigh by-productexist．Therefore，it is tosceeneminentstrain．Softof radiation，which meaningful X—raysynchronous is andmonochromatic，hastheCk、Nk、Ok continuous，adjustable